Anticorpo policlonale coniglio anti-RAB31 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13636

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RAB31

• RAB31 codifica la proteina correlata a Ras Rab-31 (nota anche come Rab-22B), una piccola GTPasi appartenente alla famiglia Rab di regolatori chiave del traffico delle membrane intracellulari. Riferimenti correlati: PMID:11784320
• RAB31 cicla tra una forma inattiva legata al GDP e una forma attiva legata al GTP, reclutando effettori a valle che guidano la formazione, il trasporto, l'aggancio e la fusione delle vescicole.
• È richiesta per l'integrità strutturale e la normale funzione dell'apparato di Golgi e della rete trans-Golgi (TGN), e partecipa alla translocazione stimolata dall'insulina di GLUT4 verso la membrana plasmatica.
• RAB31 media il traffico del recettore del mannosio-6-fosfato (M6PR) dalla TGN agli endosomi e promuove l'internalizzazione del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) negli endosomi.
• Nelle cellule immunitarie, RAB31 contribuisce alla maturazione dei fagosomi contro patogeni inglobati come Staphylococcus aureus e Mycobacterium tuberculosis.
• La localizzazione subcellulare include l'apparato di Golgi, la membrana della rete trans-Golgi, gli endosomi precoci e le membrane dei fagosomi, riflettendo il suo comportamento dinamico di ciclo delle membrane.
• L'espressione più elevata si osserva nella placenta e nel cervello, con livelli inferiori nel cuore e nel polmone; è non rilevabile nel fegato, nel muscolo scheletrico, nel rene e nel pancreas.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la prenilazione (lipoproteina) che probabilmente regolano l'associazione con la membrana; la proteina è identificata nei dataset di proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre l'intera proteina ricombinante (aa 1–195), che potrebbe riconoscere sia le conformazioni legate al GDP che quelle legate al GTP; verificare la specificità di legame in diverse condizioni di nucleotidi se richiesto.
• Per il Western blot (WB), considerare il caricamento di controlli positivi appropriati da tessuti/lisati cellulari umani, di topo o di ratto noti per esprimere RAB31 (es. cervello, placenta). È prevista una banda vicino a 22 kDa.
• Nell'immunofluorescenza/ICC (IF/ICC), poiché RAB31 si localizza in compartimenti membranosi dinamici, utilizzare una fissazione delicata (es. 4% PFA) e una colorazione concomitante con marcatori di organelli (TGN, endosomi precoci) per confermare la specificità del segnale.
• Per l'ELISA, titolare sia l'anticorpo che l'antigene per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali; utilizzare una proteina o un peptide RAB31 ricombinante come antigene di rivestimento.
• Dato che l'anticorpo è policlonale, la coerenza tra lotti deve essere convalidata nel sistema di campione pertinente.

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