Anticorpo policlonale anti-RABGAP1 per WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3P9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RABGAP1

• RABGAP1, noto anche come proteina 1 attivante la GTPasi Rab, GAPCenA (proteina associata a GAP e centrosoma) o TBC1D11, agisce come proteina attivante la GTPasi (GAP) per RAB6A, promuovendo l'idrolisi del GTP per regolare il trasporto e la segnalazione mediati da Rab.
• Svolge un ruolo nella nucleazione dei microtubuli presso il centrosoma ed è coinvolto nella transizione metafase-anafase durante la divisione cellulare, collegando il trasporto di membrana al controllo del ciclo cellulare.
• RABGAP1 contiene un dominio TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) caratteristico delle RabGAP, insieme a regioni a coiled-coil che possono facilitare le interazioni proteina-proteina e il targeting centrosomale.
• La localizzazione è prevalentemente citoplasmatica, con arricchimento presso il centrosoma e nel citosol, come indicato dagli studi di frazionamento subcellulare e immunofluorescenza.
• La proteina è soggetta a splicing alternativo, che produce molteplici isoforme, ed è regolata dalla fosforilazione, come dimostrato dai dati di proteomica e dalla presenza di siti di fosforilazione nei database.
• Il peso molecolare è di circa 122 kDa (calcolato ~121,7 kDa); l'anticorpo riconosce una banda prossima a queste dimensioni nel Western blot di lisati appropriati.
• RABGAP1 è stata identificata in screening proteomici ad alto rendimento, confermandone l'espressione nei tessuti umani e l'associazione con il proteoma centrosomale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro una regione C-terminale (aa 830-1069) di RABGAP1 umano, che comprende parte del dominio a coiled-coil e può includere regioni critiche per l'attività GAP; pertanto, l'anticorpo può riconoscere epitopi funzionali.
• Per il Western blot, utilizzare condizioni standard riducenti e caricare 20–50 µg di lisato cellulare totale; la banda prevista è a 122 kDa e la reattività crociata con il topo consente l'analisi in linee cellulari comuni come NIH/3T3 o MEF.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda il recupero antigenico utilizzando un tampone citrato o EDTA; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo (ad esempio 1:50–1:200) e includere controlli negativi appropriati per confermare la specificità.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; si consiglia di eseguire preliminarmente titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e di anticorpo.
• Poiché RABGAP1 è una proteina a bassa abbondanza coinvolta nella regolazione del ciclo cellulare, si può prendere in considerazione la sincronizzazione delle cellule per arricchire la popolazione di cellule in metafase, qualora si valuti la localizzazione centrosomale o le variazioni di espressione dipendenti dal ciclo cellulare.

CamelBio: il vostro partner unico per l'approvvigionamento

CamelBio è il vostro partner unico per l'approvvigionamento di materie prime per IVD e collega i produttori di diagnostica e i laboratori di ricerca con anticorpi e reagenti di alta qualità. Questo anticorpo policlonale anti-RABGAP1 fa parte del nostro ampio portafoglio per la ricerca sul ciclo cellulare e sulla biologia del centrosoma. Supportiamo lo sviluppo dei vostri test con coppie di anticorpi validate, reagenti sfusi e soluzioni di approvvigionamento personalizzate per target rari, aiutandovi a passare dal concetto alla clinica in modo efficiente.