Anticorpo policlonale contro la GTPase-activating protein 1 anti-Rac (RGAP1) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H0H5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della RGAP1

• La Rac GTPase-activating protein 1 (RGAP1), nota anche come MgcRacGAP o CYK4, è un componente centrale del complesso centralspindlin, essenziale per la citochinesi. Medita la segnalazione dipendente dai microtuboli e guidata da Rho che porta alla formazione dell'anello contrattile della miosina e alla successiva divisione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18511905
• La RGAP1 interagisce sequenzialmente con ECT2 e RAB11FIP3 per coordinare l'ingressione del solco di scissione e l'abscissione, garantendo un corretto attacco del corpo intermedio alla membrana cellulare durante le fasi finali della citochinesi. Riferimenti correlati: PMID:18511905
• Oltre al suo ruolo nella divisione cellulare, la RGAP1 regola la crescita e la differenziazione delle cellule ematopoietiche e svolge un ruolo fondamentale nell'eritropoiesi. Riferimenti correlati: PMID:10979956, PMID:34818416
• La proteina mostra una forte attività GTPase-attivante nei confronti di CDC42 e RAC1, con attività più debole verso RHOA, evidenziando la sua funzione regolatoria nelle reti di segnalazione delle GTPasi della famiglia Rho.
• La RGAP1 si localizza dinamicamente in più compartimenti subcellulari, tra cui nucleo, citoplasma, fuso mitotico, solco di scissione, corpo intermedio e membrana cellulare, riflettendo i suoi molteplici ruoli durante tutto il ciclo cellulare.
• L'espressione tissutale è più alta nel testicolo, nel timo e nella placenta, con una regolazione dipendente dal ciclo cellulare che raggiunge il picco nella fase G2/M; contribuisce anche alla spermatogenesi e al trasporto di solfati nelle cellule germinali maschili.
• La proteina contiene domini a dito di zinco, regioni a coiled-coil e motivi di legame lipidico, e subisce fosforilazione e acetilazione, come indicato dai dati strutturali e di modificazione post-traduzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre i residui 353–632 della RGAP1 umana, una regione che può comprendere domini funzionali; verificare la copertura di eventuali varianti di splicing o isoforme note nella vostra impostazione sperimentale.
• Nel Western blot, ci si aspetta una banda predominante vicino a 71 kDa in campioni di uomo, topo e ratto. Convalidare la specificità utilizzando controlli positivi e negativi appropriati, come lisati di knockout o modelli di sovraespressione.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbero essere necessari passaggi di recupero dell'antigene; ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per il tessuto bersaglio per ottenere una colorazione robusta.
• L'immunofluorescenza (IF/ICC) può rivelare la localizzazione della RGAP1 al fuso mitotico, al corpo intermedio e al solco di scissione nelle cellule in divisione; eseguire una co-colorazione con marcatori del citoscheletro (ad esempio, α-tubulina) per confermare le strutture mitotiche.
• La rilevazione basata su ELISA può essere adatta per quantificare la RGAP1 in lisati cellulari o preparazioni di proteine ricombinanti. Includere curve di riferimento e controlli in bianco per garantire la linearità e la specificità del test.

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