Anticorpo policlonale coniglio Anti-Rac1/2/3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P63000 / P15153 / P60763

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Rac1/2/3

• Rac1, noto anche come p21-Rac1, TC-25 o MIG5, è un membro della famiglia Rho delle piccole GTPasi. Lo splicing alternativo produce l'isoforma B, che è espressa principalmente nella pelle e nei tessuti epiteliali intestinali ed è frequentemente sovraespressa nei tumori colorettali.
• Agisce come un interruttore molecolare che cicla tra lo stato attivo legato al GTP e lo stato inattivo legato al GDP, regolando processi diversi tra cui la fagocitosi, la migrazione cellulare, l'arruffamento della membrana e le vie secretorie. Riferimenti correlati: PMID:1643658, PMID:22843693, PMID:23512198
• Dopo l'attivazione, lega effettori come PAK e PKN2, mediando la riorganizzazione del citoscheletro di actina, l'assemblaggio/smontaggio delle adesioni cellulari (via DSG3) e la segnalazione indotta da fattori di crescita. Riferimenti correlati: PMID:9121475, PMID:12695502, PMID:22796473
• È una subunità essenziale del complesso NADPH ossidasi dei fagociti, che produce ioni superossido per l'uccisione microbica. Riferimenti correlati: PMID:38355798
• Si localizza sulla membrana plasmatica, nei lamellipodi, nelle increspature, nei dendriti, nelle sinapsi e nel nucleo, supportando i suoi ruoli nella motilità cellulare, nella plasticità sinaptica e nella segnalazione nucleare.
• Le modifiche post-traduzionali includono prenilazione, palmitoilazione, fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano dinamicamente il suo targeting alla membrana, l'attività e la stabilità proteica.
• L'isoforma B mostra un scambio GDP/GTP indipendente da GEF accelerato e un'idrolisi del GTP compromessa, parzialmente ripristinata dalle proteine GTPasi-attivanti (GAP), ed è associata alla neoplasia colorettale. Riferimenti correlati: PMID:14625275

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo policlonale è prodotto contro una proteina ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1-192 comuni a Rac1, Rac2 e Rac3, consentendo la rilevazione pan-Rac.
• Per Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 21 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cellule intere da cellule umane, di topo o di ratto e titolare la diluizione dell'anticorpo per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene può migliorare la colorazione; convalidare sempre con tessuti di controllo positivi e negativi appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), fissare le cellule con paraformaldeide e permeabilizzare; Rac1/2/3 si localizza sulle increspature della membrana, nei lamellipodi e nei compartimenti citoplasmatici.
• Quando si utilizza in ELISA, assicurarsi che l'antigene ricombinante o il bersaglio nativo siano accessibili; la natura policlonale può fornire un'amplificazione del segnale robusta.
• Poiché le proteine Rac sono altamente conservate tra le specie, è prevista la reattività crociata con uomo, topo e ratto; in ogni caso, verificare i livelli di espressione nel sistema modello specifico.

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