Anticorpo monoclonale anti-RACK1 per WB ed ELISA - P63244

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RACK1

• RACK1 (proteina RACK1 della subunità ribosomiale piccola), nota anche come GNB2L1, HLC-7, PIG21, agisce come proteina scaffold che collega le vie di segnalazione al macchinario traduzionale.
• In quanto componente della subunità ribosomiale 40S, svolge un ruolo nella repressione della traduzione.
  Riferimenti correlati: PMID:23636399
• Partecipa al controllo di qualità dei ribosomi (RQC) promuovendo l'ubiquitinazione delle subunità 40S bloccate.
  Riferimenti correlati: PMID:28132843
• RACK1 lega e stabilizza la protein chinasi C (PKC) attivata, potenziando la fosforilazione mediata dalla PKC e favorendo potenzialmente il reclutamento della PKC al ribosoma per fosforilare EIF6.
• Inibisce le chinasi SRC e prolunga la fase G0/G1, regolando così la crescita cellulare.
• Si localizza nella membrana cellulare, nel citoplasma, nel nucleo, nei dendriti e nelle coppe fagocitiche, riflettendo i suoi molteplici ruoli.
• È coinvolta nelle interazioni ospite-patogeno, tra cui il potenziamento della fosforilazione di Nef di HIV-1, il rimodellamento dei ribosomi durante l'infezione da poxvirus e la facilitazione della traduzione mediata da IRES per alcuni virus a RNA.
• È sovraregolata nel carcinoma epatocellulare ed è altamente espressa nelle cellule stellate epatiche attivate, suggerendo un ruolo nelle patologie epatiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 220–310 di RACK1 umano, una regione altamente conservata nell'uomo, nel topo e nel ratto; verificare la reattività crociata mediante allineamento delle sequenze o nel proprio sistema campione.
• Per il Western blotting, si prevede una banda di circa 35 kDa; si consiglia di utilizzare un controllo di caricamento delle proteine totali e marcatori di peso molecolare appropriati.
• RACK1 è ampiamente espresso; tuttavia, l'espressione può essere aumentata nelle linee cellulari di carcinoma epatico o nelle cellule stellate epatiche attivate, che potrebbero fungere da controlli positivi.
• Dato il coinvolgimento di RACK1 in molteplici vie di segnalazione, si consiglia di utilizzare inibitori specifici (ad es. inibitori della PKC) per studiare le interazioni dipendenti dalla fosforilazione.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, può essere applicabile il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o con lisati cellulari; validare rispetto a una curva standard nota.

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