Anticorpo Policlonale Anti-RACK1 da Coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P63244

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di RACK1

• RACK1 (Recettore per la Chinasi C Attivata 1), noto anche come GNB2L1, HLC-7 o PIG21, è una proteina scaffolding e un componente integrante della subunità ribosomiale 40S. Contiene più domini ripetuti WD che mediano diverse interazioni proteina-proteina.
• Come parte del ribosoma, RACK1 è coinvolto nella repressione della traduzione (PubMed:23636399) e avvia il controllo qualità del ribosoma (RQC) promuovendo l'ubiquitinazione delle subunità 40S durante la traduzione bloccata (PubMed:28132843). Riferimenti correlati: PMID:23636399 PMID:28132843
• Lega e stabilizza la proteina chinasi C attivata (PKC), potenziando la fosforilazione mediata da PKC, e può reclutare PKC al ribosoma per fosforilare EIF6, regolando quindi la traduzione.
• RACK1 modula un'ampia gamma di vie di segnalazione e processi cellulari, tra cui la progressione del ciclo cellulare (prolunga la fase G0/G1), l'apoptosi (promuove l'oligomerizzazione di BAX), la segnalazione delle integrine e l'inibizione della via Wnt.
• Subcellularmente, RACK1 si trova nel citoplasma, sulla membrana cellulare, nel nucleo, nella regione perinucleare, sulle dendriti e nelle coppe fagocitarie, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali.
• Nel fegato, RACK1 è espresso a livelli più alti nelle cellule stellate epatiche attivate rispetto agli epatociti o alle cellule di Kupffer, ed è sovraregolato nei carcinomi epatocellulari, il che lo implica nella fibrosi epatica e nel cancro.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono fosforilazione e acetilazione. RACK1 partecipa anche alle interazioni ospite-virus, come il potenziamento della fosforilazione di Nef dell'HIV‑1 e il rimodellamento dei ribosomi per la traduzione dell'mRNA del poxvirus.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 30–290 di RACK1 umano, comprendendo la maggior parte della proteina inclusi diversi ripetizioni WD. Si prevede che questo progetto generi anticorpi che riconoscono sia le conformazioni native sia denaturate.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 35 kDa. Utilizzare condizioni di SDS‑PAGE appropriate e includere un controllo di carico adatto.
• Negli esperimenti IF/ICC, RACK1 mostra localizzazione citoplasmatica, di membrana e nucleare. Si consiglia di ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione e fissazione per rilevare tutte le frazioni proteiche.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Validare la sua performance con proteina RACK1 purificata o lisati cellulari rilevanti nel vostro setup di saggio.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con RACK1 di topo e ratto, rendendolo adatto per studi su modelli roditori. Confermare la reattività specie-specifica nel vostro sistema sperimentale.

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