Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Rad23A per WB, ELISA - P54725

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Rad23A

• RAD23A (HR23A) è una proteina multifunzionale che partecipa alla demetilazione dell'istone H4K20, alla riparazione del DNA, alla degradazione proteica dipendente dall'ubiquitina, alla regolazione trascrizionale e alla replicazione virale.
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• Demetila specificamente la lisina 20 mono-, di- e trimetilata dell'istone H4 (H4K20me1, H4K20me2, H4K20me3), regolando così la trascrizione dei geni codificanti (tramite H4K20me1) e la trascrizione degli elementi ripetuti (tramite H4K20me3).
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• RAD23A svolge un ruolo critico nella riparazione per escissione di nucleotidi del genoma globale (GG-NER) formando un complesso con XPC che riconosce il danno al DNA.
  Riferimenti correlati: PMID:9372924
• Si lega alle catene poliubiquitiniche legate a 'Lys-48' e, con minore affinità, a quelle legate a 'Lys-63', consegnando i substrati ubiquitinati al proteasoma 26S per la degradazione.
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• Localizzata principalmente nel nucleo, RAD23A subisce splicing alternativo ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina.
• Durante l'infezione da HIV-1, RAD23A facilita la replicazione virale in cellule non proliferanti e macrofagi primari mediando l'associazione di Vpr con il proteasoma dell'ospite.
• Il peso molecolare previsto di RAD23A è di circa 40 kDa (calcolato 39.609 Da).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina RAD23A umana a lunghezza intera (aa 1–363), fornendo un potenziale di riconoscimento ampio; confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blotting, utilizzare un protocollo standard con un anticorpo policlonale; la banda attesa appare vicino ai 40 kDa. Ottimizzare la diluizione in base ai livelli di espressione endogena.
• Per l'ELISA, validare l'anticorpo con RAD23A ricombinante o antigeni peptidici per stabilire sensibilità e linearità.
• La reattività incrociata è documentata per campioni umani e di topo; l'attività in altre specie dovrebbe essere verificata se necessario.
• Considerare l'uso di inibitori delle proteasi durante la preparazione del campione, poiché RAD23A potrebbe essere suscettibile alla degradazione.
• L'anticorpo potrebbe rilevare varianti di splicing o forme modificate; confermare l'identità mediante spettrometria di massa o controlli di knockdown dove necessario.

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