Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Rad50 per WB, IHC-P, IP, ELISA - Q92878

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RAD50

• RAD50 è un componente centrale del complesso MRN (MRE11-RAD50-NBS1) e svolge un ruolo fondamentale nella riparazione delle rotture del doppio filamento del DNA, nella ricombinazione omologa, nell'integrità dei telomeri e nella meiosi.
  Riferimenti correlati: PMID:15064416, PMID:21757780, PMID:27889449
• Il complesso MRN media la resezione delle estremità del DNA, generando DNA a singolo filamento cruciale per la ricombinazione omologa, e facilita il reclutamento di fattori di riparazione e l'attivazione delle chinasi ATM/ATR dopo il danno al DNA.
  Riferimenti correlati: PMID:15064416, PMID:27889449, PMID:28867292, PMID:15790808, PMID:16622404
• Il complesso possiede attività endonucleasica a singolo filamento ed esonucleasica 3′-5′ a doppio filamento (fornita da MRE11), mentre RAD50 lega e ancorra le estremità del DNA per regolare l'attività di MRE11.
  Riferimenti correlati: PMID:11741547, PMID:9590181, PMID:9651580, PMID:12805565, PMID:28134932
• RAD50 contiene domini leganti ATP; il legame con l'ATP induce una conformazione chiusa che posiziona in modo ottimale le estremità del DNA all'interno del sito attivo di MRE11 (per similarità).
• RAD50 è prevalentemente nucleare, localizzandosi ai telomeri dei cromosomi e ai siti di danno al DNA; partecipa anche all'elaborazione degli R-loop e alla modulazione della formazione dei t-loop.
  Riferimenti correlati: PMID:10888888, PMID:31537797
• RAD50 è espresso a bassi livelli nella maggior parte dei tessuti, con un'espressione elevata nel testicolo e nei fibroblasti.
• RAD50 è soggetto ad acetilazione e fosforilazione, ed è caratterizzato da motivi leganti ATP, coiled-coil, leganti lo zinco e idrolasi.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per l'analisi Western blot, attendersi una banda vicino a 154 kDa. Utilizzare un lisato di controllo positivo appropriato da cellule umane, di topo o di ratto e includere un controllo di caricamento.
• Per IHC-P su sezioni incluse in paraffina, possono essere considerati metodi standard di recupero dell'antigene (ad es., recupero dell'epitopo indotto dal calore); si raccomandano esperimenti pilota.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), utilizzare protocolli standard con fasi di pre-pulizia; l'anticorpo è adatto per isolare i complessi endogeni di RAD50 da estratti nucleari.
• Per l'ELISA, l'immunogeno peptidico (residui N-terminali 1-100) può essere utilizzato per validare il titolo anticorpale; la reattività incrociata con proteine strettamente correlate dovrebbe essere esclusa mediante allineamento di sequenze.
• Grazie alla sua reattività interspecie, questo anticorpo può essere impiegato per studi comparativi in modelli umani, di topo e di ratto di riparazione del DNA.

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