Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Rad51 per WB, ELISA, ChIP - Q06609

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina di riparazione del DNA RAD51 omologo 1 (RAD51)

• RAD51 catalizza lo scambio di filamenti di DNA omologo, un passaggio centrale nella riparazione del DNA tramite ricombinazione omologa (HR), formando filamenti nucleoproteici dipendenti dall'ATP sul DNA a singolo filamento (ssDNA). Riferimenti correlati: PMID:12205100, PMID:12442171, PMID:15937124, PMID:17515904
• Riconosce l'omologia tra partner di DNA omologhi e catalizza lo scambio di filamenti per formare molecole congiunte, collegando le rotture del DNA processate ai modelli di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:12205100, PMID:18417535, PMID:19303847
• RAD51 viene reclutato alle forcelle di replicazione bloccate per risolvere lo stress di replicazione e partecipa alla riparazione dei legami incrociati tra filamenti. Riferimenti correlati: PMID:27797818, PMID:31844045, PMID:26253028
• In condizioni di stress ossidativo, RAD51 collabora con RAD51C e XRCC3 per regolare il numero di copie del DNA mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:20413593
• Durante la meiosi, RAD51 agisce come fattore accessorio non catalitico per la ricombinasi DMC1, facilitando l'appaiamento e il crossing over cromosomico.
• RAD51 si localizza dinamicamente nel nucleo, sui cromosomi, nel citoplasma, nella regione perinucleare, nella matrice mitocondriale e nel centrosoma, riflettendo i suoi molteplici ruoli nel metabolismo del DNA.
• RAD51 è altamente espresso nel testicolo e nel timo, con espressione moderata nell'intestino tenue, placenta, colon, pancreas e ovaio, e debole espressione nella mammella. Riferimenti correlati: PMID:18417535
• RAD51 subisce modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, che regolano la sua attività e le interazioni proteiche.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione N-terminale (aa 1-100) della RAD51 umana; questo epitopo è conservato nel topo e nel ratto, il che può spiegare la reattività crociata osservata.
• Per Western blot (WB), utilizzare condizioni riducenti e denaturanti; aspettarsi una banda intorno ai 37 kDa. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevazione per il tuo specifico tipo di campione.
• Per ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione contro un epitopo non sovrapposto; convalidare con RAD51 ricombinante o lisati cellulari.
• Negli saggi ChIP, utilizzare una reticolazione appropriata (ad es. formaldeide) e ottimizzare la sonicazione; l'arricchimento di RAD51 può essere indotto da agenti dannosi per il DNA (ad es. etoposide).
• È stato riportato che questo anticorpo reagisce con uomo, topo e ratto; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione dell'immunogeno prima dell'uso.

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