Anticorpo policlonale di coniglio Anti-RAD51 per WB, IHC-P, ELISA - Q06609

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RAD51

• RAD51 è l'omologo umano della proteina batterica RecA e un mediatore chiave della ricombinazione omologa.
• Si lega al DNA a filamento singolo in modo dipendente da ATP, formando filamenti nucleoproteici che effettuano la ricerca di omologia e lo scambio di filamenti durante la riparazione delle rotture doppie del DNA. Riferimenti correlati: PMID:12205100, PMID:15937124, PMID:17515904
• RAD51 sostituisce la proteina A di replicazione (RPA) dall'ssDNA e stabilizza i filamenti RAD51-ssDNA bloccando l'idrolisi di ATP. Riferimenti correlati: PMID:20729859
• Catalizza la formazione di molecole congiunte tra estremità di DNA processati e modelli di riparazione omologhi. Riferimenti correlati: PMID:12205100, PMID:18417535, PMID:19303847
• RAD51 può staccare il DNA nucleosomale dagli istoni, facilitando la riparazione nella cromatina. Riferimenti correlati: PMID:38509361
• Viene reclutato alle forcelle di replicazione bloccate per promuovere il riavvio della forcella e prevenire il collasso. Riferimenti correlati: PMID:27797818, PMID:31844045
• Inoltre, RAD51 svolge una funzione nel mantenimento del DNA mitocondriale sotto stress ossidativo e partecipa alla riparazione dei legami crociati tra filamenti. Riferimenti correlati: PMID:20413593, PMID:26253028
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo e sui cromosomi, ma anche nel citoplasma, nel centrosoma e nella matrice mitocondriale.
• RAD51 è altamente espressa nel testicolo, nel timo e in altri tessuti proliferativi, con livelli più bassi nella mammella. Riferimenti correlati: PMID:18417535

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la lunghezza intera della RAD51 umana (aa 1-339), quindi l'anticorpo policlonale riconosce probabilmente più epitopi e può rilevare diverse isoforme.
• Per il Western blot è prevista una banda intorno ai 37 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e di validare con lisati cellulari positivi e negativi appropriati.
• Per IHC-P, il recupero dell'antigene potrebbe essere necessario; testare diversi buffer di recupero e diluizioni dell'anticorpo su tessuti positivi noti (es. testicolo, timo).
• Per ELISA, utilizzare la proteina ricombinante o lisati cellulari come antigene di rivestimento; eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di antigene di rivestimento e anticorpo di rilevamento.

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