Anticorpo Policlonale Anti-RAD51C per IF/ICC ed ELISA - O43502

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RAD51C

• RAD51C, noto anche come proteina di riparazione del DNA RAD51 omologo 3 o RAD51L2, è un membro della famiglia dei paraloghi di RAD51 coinvolto nella riparazione di rotture del doppio filamento di DNA tramite ricombinazione omologa (HR).
• È un componente fondamentale dei complessi BCDX2 (RAD51B-RAD51C-RAD51D-XRCC2) e CX3 (RAD51C-XRCC3), che agiscono in fasi distinte della via HR dipendente da BRCA1-BRCA2, dal reclutamento di RAD51 alla risoluzione delle giunzioni di Holliday.
• RAD51C svolge un ruolo precoce nella segnalazione del danno al DNA facilitando la fosforilazione di CHEK2, portando all'arresto del ciclo cellulare e all'attivazione dell'HR, e partecipa anche alla migrazione del ramo e alla risoluzione delle HJ nelle fasi tardive.
• La localizzazione subcellulare include il nucleo, il citoplasma, la regione perinucleare e il mitocondrio, riflettendo i suoi molteplici ruoli nel mantenimento del genoma e nella regolazione del numero di copie del DNA mitocondriale sotto stress ossidativo.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, ed è classificato sotto parole chiave come danno al DNA, ricombinazione del DNA, riparazione del DNA e anemia di Fanconi; mutazioni in RAD51C sono associate al gruppo di complementazione O dell'anemia di Fanconi e alla suscettibilità al cancro al seno.
• RAD51C è ampiamente espresso, con i livelli più alti nel testicolo, muscolo cardiaco, milza e prostata, in linea con la sua funzione critica nella ricombinazione meiotica e nei tessuti proliferativi.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-135) di RAD51C umano; l'anticorpo può riconoscere epitopi all'interno di questo dominio conservato e potrebbe essere adatto per rilevare sia le isoforme a lunghezza intera che quelle troncate.
• Per le applicazioni IF/ICC, considerare di fissare le cellule con paraformaldeide e permeabilizzarle con detergente per consentire l'accesso al nucleo, poiché RAD51C si sposta tra citoplasma e nucleo.
• Nell'ELISA, la natura policlonale può fornire un'elevata sensibilità, ma sono consigliati passaggi di cross-assorbimento o blocco per minimizzare il fondo dovuto ad altri paraloghi di RAD51 che condividono omologia di sequenza.
• Convalidare attentamente la reattività incrociata tra specie; questo anticorpo è generato contro RAD51C umano e la reattività incrociata è indicata solo per l'uomo; le prestazioni in altre specie dovrebbero essere confermate sperimentalmente se necessario.
• Dato il peso molecolare di ~42 kDa, utilizzare marcatori prestainati appropriati e confermare l'identità della banda con lisati cellulari positivi e negativi in cui i livelli di espressione di RAD51C sono noti (ad es. linee cellulari di testicolo o cancro).

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