Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Raf1 per WB, ELISA - P04049

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Raf1

• RAF1 codifica per la serina/treonina-proteina chinasi Raf1 (c-RAF o Raf-1), un collegamento regolatorio critico tra le GTPasi Ras associate alla membrana e la cascata MAPK/ERK, controllando decisioni sul destino cellulare come proliferazione, differenziazione, apoptosi, sopravvivenza e trasformazione oncogenica.
• Dopo l'attivazione, Raf1 avvia la cascata MAPK fosforilando sequenzialmente le chinasi dual-specificità MAP2K (MEK1/MEK2) e successivamente le chinasi regolate da segnali extracellulari (ERK1/ERK2).
• Oltre alla via canonica MAPK, Raf1 fosforila numerosi altri substrati tra cui BAD (promuovendo la sopravvivenza cellulare), adenilato ciclasi (ADCY2/5/6), PPP1R12A e troponina T cardiaca (TNNT2), modulando così apoptosi, segnalazione cAMP e contrazione muscolare.
• Raf1 esercita effetti anti-apoptotici traslocando al mitocondrio, dove si lega a BCL2 e sposta il pro-apoptotico BAD, proteggendo direttamente le cellule dalla morte.
• La chinasi regola la segnalazione Rho e la migrazione cellulare, contribuisce alla guarigione delle ferite e guida la trasformazione oncogenica delle cellule epiteliali reprimendo la proteina delle giunzioni strette occludina (OCLN) tramite il repressore trascrizionale SNAI2/SLUG.
• Sottocellulare, Raf1 si localizza dinamicamente tra citoplasma, membrana cellulare, mitocondrio e nucleo, in linea con i suoi diversi ruoli di segnalazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (amminoacidi 1–100), suggerendo che questo anticorpo monoclonale possa riconoscere un epitopo all'interno del dominio regolatorio; verificare la reattività nella specie target e nel tipo di campione.
• Per il western blotting (WB), Raf1 viene rilevato a circa 73 kDa; considerare l'uso di linee cellulari con espressione nota di Raf1 (es. HeLa, Jurkat) come controlli positivi.
• La reattività crociata con topo e ratto implica la conservazione dell'epitopo, ma si raccomanda di validare il rilevamento in quelle specie nelle specifiche condizioni sperimentali.
• Questo anticorpo è validato per WB ed ELISA; altre applicazioni (es. IHC, ICC, IP) non sono state testate e richiederebbero ottimizzazione e verifica da parte dell'utente finale.

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