Anticorpo policlonale anti-RAG2 di coniglio per WB, ELISA - P55895

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina 2 di attivazione della ricombinazione V(D)J

• La proteina 2 di attivazione della ricombinazione V(D)J (RAG2) è un componente centrale del complesso RAG, essenziale per l'assemblaggio di geni diversificati di immunoglobuline e recettori delle cellule T durante lo sviluppo dei linfociti.
• RAG2 è richiesta per tutte le attività catalitiche di RAG1, mediando la scissione del DNA tramite nicking e formazione di hairpin per generare estremità codificanti e di segnale.
• RAG2 agisce come sensore dello stato della cromatina, legando l'istone H3 trimetilata alla Lisina 4 (H3K4me3) per stimolare sia le fasi di nicking che quelle di formazione di hairpin.
• Il complesso RAG contribuisce all'esclusione allelica nelle cellule pre-B inducendo il riposizionamento dipendente da ATM dell'allelo non ricombinato verso l'eterocromatina pericentromerica.
• RAG2 si localizza nel nucleo e la sua espressione è limitata alle cellule dei lignaggi B e T dei linfociti.
• Le parole chiave di UniProt evidenziano i suoi ruoli nella regolazione della cromatina, nella ricombinazione del DNA e nell'associazione con malattie come l'immunodeficienza combinata grave (SCID).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 258-527, una regione che include il dominio dito PHD C-terminale critico per il riconoscimento di H3K4me3; questo può produrre anticorpi che rilevano la forma a lunghezza intera e alcune isoforme troncate.
• Per il western blot (WB), considerare l'ottimizzazione della diluizione (comunemente 1:500–1:2000 per gli anticorpi policlonali) e includere lisati di cellule di lignaggio linfocitario appropriati come controlli positivi.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare la proteina RAG2 ricombinante o il peptide come antigene di rivestimento; la reattività crociata con RAG2 di topo consente la validazione nei sistemi murini.
• A causa della natura policlonale, confermare la coerenza tra i lotti e validare nel sistema di campioni specifico (es. linfociti primari, timociti) per garantire le prestazioni previste.

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