Anticorpo monoclonale anti-RALBP1 per IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15311

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RALBP1

• RALBP1, noto anche come RLIP76 o proteina 1 interagente con Ral, è una proteina multifunzionale di circa 76 kDa codificata dal gene RALBP1 (GeneID: 10928).
• Agisce come effettore a valle di RALA e RALB e funziona come proteina attivatrice della GTPasi (GAP), inattivando CDC42 e RAC1 stimolando la loro attività GTPasica intrinseca. Riferimenti correlati: PMID:7673236
• Partecipa alla regolazione dell'endocitosi mediata dai recettori e dipendente dalla segnalazione di Ral, inclusa l'internalizzazione indotta dal ligando dei recettori dell'EGF e dell'insulina. Riferimenti correlati: PMID:10910768, PMID:12775724
• Durante la mitosi, funge da impalcatura per la fosforilazione di EPSIN/EPN1 mediata da ciclina B-CDK1, inibendo l'endocitosi; inoltre facilita la fissione mitocondriale fungendo da impalcatura per la fosforilazione di DNM1L nei mitocondri. Riferimenti correlati: PMID:12775724, PMID:21822277
• Possiede un'attività di trasporto dipendente dall'ATP per i coniugati del glutatione e gli xenobiotici come la doxorubicina, contribuendo potenzialmente alla resistenza multifarmaco nelle cellule tumorali.
• È localizzata a livello subcellulare in molteplici compartimenti, tra cui la membrana cellulare, il citosol, il citoscheletro (polo del fuso), il nucleo e i mitocondri.
• È espressa ubiquitariamente a bassi livelli, con un'espressione particolarmente elevata negli eritrociti.
• È modificata post-traduzionalmente mediante acetilazione e fosforilazione; è classificata tra le proteine associate a caratteristiche quali legame all'ATP, attivazione della GTPasi e attività di traslocasi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 200–300; considerare che l'epitopo potrebbe essere parzialmente sepolto nella conformazione nativa, rendendo potenzialmente necessarie la denaturazione o un adeguato recupero antigenico per l'immunoistochimica.
• Per IHC-P, si raccomandano il recupero antigenico standard indotto dal calore (ad esempio, tampone citrato a pH 6,0) e una concentrazione ottimizzata dell'anticorpo primario; validare in specie con reattività crociata confermata (umano, topo, ratto).
• Nell'IF/ICC, la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1–0,3% può migliorare l'accessibilità degli antigeni nucleari o mitocondriali; includere controlli negativi appropriati.
• Le applicazioni ELISA traggono beneficio dalla titolazione dell'anticorpo contro il peptide immunogeno o la proteina RALBP1 ricombinante, al fine di stabilire la concentrazione ottimale di rivestimento e l'intervallo di rilevazione.

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