Anticorpo policlonale Anti-Rap1B per WB, IF/ICC, ELISA - P61224

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di Rap1B

• Rap1B (proteina Ras-correlata Rap-1b), nota anche come proteina GTP-binding smg p21B, è un membro della superfamiglia delle piccole GTPasi Ras.
• Codificata dal gene RAP1B (ID gene: 5908) nell'uomo, la proteina esiste in più isoforme dovute allo splicing alternativo.
• Rap1B possiede attività GTPasi intrinseca e funge da interruttore molecolare nella trasduzione del segnale, ciclando tra lo stato attivo legato al GTP e quello inattivo legato al GDP.
• Svolge un ruolo fondamentale nella polarità delle cellule endoteliali e nella formazione del lume vascolare, contribuendo all'attività polarizzante di KRIT1 e CDH5.
• È necessario per la localizzazione di PRKCZ fosforilato, PARD3 e TIAM1 alle giunzioni cellulari, stabilizzando così la funzione di barriera endoteliale basale.
• Subcellularmente, Rap1B si localizza sulla membrana cellulare, nel citosol e alle giunzioni cellulari.
• La proteina subisce diverse modificazioni post-traduzionali tra cui la prenilazione (modificazione lipidica), la fosforilazione e la metilazione, che regolano la sua associazione alla membrana e la sua attività.
• Clinicamente, le mutazioni di RAP1B sono associate a varianti patologiche, evidenziando la sua importanza per la salute umana.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per Western blot, utilizzare linee cellulari umane o di topo note per esprimere Rap1B (es. cellule endoteliali) come controllo positivo; è attesa una banda a circa 21 kDa.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, considerare di ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'accessibilità all'antigene, poiché Rap1B si localizza sulla membrana cellulare e alle giunzioni.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere testato contro la proteina ricombinante Rap1B (come l'immunogeno) per confermare il legame; titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale.
• Data la natura policlonale, l'anticorpo può rilevare più isoforme di Rap1B o membri correlati della famiglia Rap; convalidare la specificità nel sistema di campionamento in uso.
• La reattività crociata è riportata per uomo e topo; se si utilizzano campioni di ratto, condurre esperimenti pilota per verificare la reattività.

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