Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-RAP1B per WB, IF/ICC, ELISA - P61224

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Ras-correlata Rap-1b

• RAP1B è un membro della superfamiglia Ras delle piccole GTPasi, funzionando come interruttore molecolare ciclando tra stati inattivi legati al GDP e attivi legati al GTP.
• Possiede attività GTPasica intrinseca e contribuisce all'instaurazione e al mantenimento della polarità delle cellule endoteliali e dell'integrità del lume vascolare.
• RAP1B è necessaria per la corretta localizzazione delle proteine di polarità PRKCZ, PARD3 e TIAM1 alle giunzioni cellulari, supportando così la funzione di barriera endoteliale basale.
• La proteina si trova sulla membrana cellulare, nel citosol e alle giunzioni cellulari, riflettendo il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale.
• RAP1B subisce modificazioni post-traduzionali tra cui prenilazione e metilazione, critiche per l'associazione alla membrana e la funzione.
• Lo splicing alternativo dà origine a varianti trascrizionali multiple e la proteina è soggetta a ADP-ribosilazione e fosforilazione, come notato nelle parole chiave UniProt.
• È stata identificata in vari studi di proteomica ed è associata a varianti di malattia, evidenziandone la rilevanza clinica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 81–181 di RAP1B umano (NP_056461.1), una regione interna conservata tra le specie; considerare ciò quando si progettano saggi epitopo-specifici.
• Per il Western blot (WB), possono essere osservate bande multiple (15–20 kDa) a causa dello splicing alternativo e delle modificazioni post-traduzionali; validare con controlli appropriati.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), RAP1B si localizza sulla membrana cellulare, nel citoplasma e alle giunzioni cellulari; ottimizzare fissazione e permeabilizzazione per preservare queste strutture.
• Per l'ELISA, confermare le condizioni di rivestimento e la specificità dell'anticorpo utilizzando proteina RAP1B ricombinante o lisati cellulari pertinenti.
• È attesa una reattività incrociata con topo e ratto; tuttavia, convalidare sempre nel sistema di campioni target per confermare le prestazioni.

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