pAb di coniglio anti-RAPH1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q70E73

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RAPH1

• RAPH1 (proteina 1 contenente i domini associati a Ras e di omologia alla pleckstrina), nota anche come Lamellipodin, PREL-2 e ALS2CR18/ALS2CR9, contiene domini PH e RA tipici degli adattatori di segnalazione che collegano i segnali di membrana al citoscheletro.
• Funzione principale: agisce come mediatore dei segnali di membrana localizzati, regolando criticamente le dinamiche dei lamellipodi e regolando negativamente l'adesione cellulare, influenzando così la motilità e la morfologia cellulare.
• Famiglia genica e isoforme: codificata dal gene RAPH1; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme, tra cui RMO1 e RMO1-RAPH1, che mostrano distinti pattern di espressione tessuto-specifici.
• Localizzazione subcellulare: si trova sulla membrana cellulare e nel citoscheletro, con arricchimento nei lamellipodi e nei filopodi, protrusioni dinamiche basate sull'actina essenziali per la migrazione e l'adesione cellulare.
• Distribuzione tissutale: espressa ubiquitariamente nei tessuti; l'isoforma RMO1-RAPH1 mostra i livelli più elevati nel cervello, nel cuore, nelle ovaie e nell'embrione in sviluppo, mentre l'isoforma RMO1 è maggiormente abbondante nel fegato e presenta livelli bassi nelle cellule B.
• Modifiche post-traduzionali: soggetta ad acetilazione e fosforilazione; classificata come fosfoproteina, e la sua struttura 3D è stata determinata sperimentalmente, sottolineando il suo ruolo nella segnalazione e nel rimodellamento del citoscheletro.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo policlonale è stato ottenuto contro una proteina di fusione ricombinante comprendente la regione N-terminale (aa 1-240) di RAPH1 umano; si consiglia di verificare la specificità del rilevamento delle isoforme mediante knockdown o analisi dei trascritti specifici delle isoforme.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 135 kDa; assicurarsi di ottenere un'adeguata estrazione proteica da campioni freschi o ben conservati e valutare l'aggiunta di inibitori delle fosfatasi per preservare gli stati di fosforilazione.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), si raccomanda la permeabilizzazione per consentire l'accesso alle frazioni associate alla membrana e al citoscheletro; eseguire controlli appropriati per distinguere i segnali specifici da quelli aspecifici.
• È stata segnalata reattività crociata con topo e ratto; quando si utilizzano queste specie, confermare l'omologia della sequenza nella regione dell'immunogeno e ottimizzare le condizioni per ciascun sistema modello.

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