Anticorpo monoclonale Anti-RARS di coniglio per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P54136

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RARS

• L'arginina--tRNA ligasi, citoplasmatica (nomi alternativi: Arginil-tRNA sintetasi, ArgRS), è codificata dal gene RARS1 (noto anche come RARS) e appartiene alla famiglia delle aminoacil-tRNA sintetasi di classe I. Catalizza l'attacco ATP-dipendente dell'arginina al suo tRNA cognato, un passaggio essenziale nella traduzione proteica sui ribosomi citoplasmatici (PubMed:25288775).
  Riferimenti correlati:
  PMID:25288775
• Fa parte di un complesso macromolecolare con altre tRNA sintetasi e proteine accessorie, facilitando l'incanalamento efficiente degli aminoacil-tRNA al ribosoma. Questo complesso multi-sintetasi migliora la fedeltà e la velocità della sintesi proteica.
• Coinvolto nella secrezione regolata e nel processamento del precursore AIMP1/p43. Modula la scissione e il rilascio della citochina infiammatoria EMAP2 (polipetide attivante monociti endoteliale 2) da AIMP1, collegando la traduzione all'immunità innata (PubMed:17443684).
  Riferimenti correlati:
  PMID:17443684
• Si localizza prevalentemente nel citosol ed è arricchito nel compartimento citoplasmatico, in linea con il suo ruolo nella traduzione e nell'assemblaggio del complesso multi-sintetasi. Non sono riportati isoforme nucleari o specifiche per organelli.
• Modificato post-traduzionalmente per acetilazione, e il gene è soggetto a inizio alternativo, producendo isoforme con N-termini distinti. Queste modifiche possono regolare l'attività enzimatica, la stabilità o la formazione del complesso.
• Le mutazioni in RARS1 sono associate alla leucodistrofia, un gruppo di disturbi che colpiscono la sostanza bianca cerebrale, sottolineando l'importanza di questo gene nello sviluppo e nella funzione neurale. I suoi ruoli "moonlighting" al di là della traduzione ne evidenziano la versatilità.
• Le parole chiave includono aminoacil-tRNA sintetasi, legame ATP, ligasi, biosintesi proteica, acetilazione e variante di malattia, riflettendo la sua funzione catalitica centrale e la rilevanza nelle patologie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che comprende i residui 1–300 di RARS umano. Questa regione N-terminale può contenere epitopi lineari e conformazionali riconosciuti dall'anticorpo monoclonale in vari saggi. Per il WB, considerare condizioni riducenti e non riducenti per valutare l'accessibilità dell'epitopo.
• Poiché il bersaglio è citoplasmatico, i protocolli IF-P e IHC-P dovrebbero includere un passaggio di permeabilizzazione (es. 0,1–0,5% Triton X-100) per una rilevazione ottimale. Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando cellule o tessuti di controllo con livelli di espressione di RARS noti.
• L'anticorpo reagisce in modo incrociato con RARS di topo, consentendone l'uso in sistemi modello murini. Tuttavia, l'omologia di sequenza dovrebbe essere confermata nella regione dell'immunogeno; un allineamento BLAST può fornire indicazioni sulla reattività attesa in altre specie.
• Per le applicazioni ELISA, testare la coppia di anticorpi con antigene ricombinante o lisati cellulari nativi. Titrare le concentrazioni dell'anticorpo di rivestimento e di rilevamento per ottenere un intervallo dinamico lineare adatto alle proprie esigenze analitiche.
• Essendo un monoclonale di coniglio, offre tipicamente alta affinità e consistenza lotto per lotto. Tuttavia, ogni nuovo lotto dovrebbe essere qualificato nel saggio di interesse, e le diluizioni di lavoro devono essere determinate empiricamente per il proprio tipo di campione e protocollo specifico.

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