Anticorpo Policlonale Anti-RASSF5 per WB, ELISA - Q8WWW0

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RASSF5

• RASSF5, noto anche come NORE1 e RAPL, è un potenziale soppressore tumorale che subisce uno splicing alternativo, producendo isoforme distinte con ruoli nell'apoptosi e nell'adesione cellulare.
• La proteina funge da effettore di Ras, mediando l'apoptosi indotta da HRAS e KRAS attraverso il complesso RASSF5-STK4/MST1.
• L'isoforma 2 collega l'attivazione di RAP1A in seguito a stimolazione del TCR o di chemochine all'attivazione dell'integrina, promuovendo la polarizzazione linfocitaria e l'adesione a ICAM1.
• RASSF5 è coinvolto nella regolazione della crescita dei microtubuli e nella migrazione direzionale delle cellule endoteliali durante la guarigione delle ferite, in associazione con RAP1A attivato.
• A livello subcellulare, RASSF5 si localizza nel citoplasma e si associa al citoscheletro, in linea con il suo ruolo nell'adesione e nella migrazione cellulare.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, e la proteina contiene un dominio zinc-finger e siti di legame per metalli.
• Ampiamente espresso nei tessuti, RASSF5 è spesso down-regolato nelle linee cellulari di tumore polmonare e nei tumori polmonari primari, supportando il suo ruolo di soppressore tumorale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari umane, di topo o di ratto; l'immunogeno copre i 265 amminoacidi N-terminali, bersagliando una regione probabilmente conservata tra le specie, quindi regolare appropriatamente la lisi e la diluizione dell'anticorpo.
• Il peso molecolare previsto è di circa 47 kDa; eseguire sempre marker di peso molecolare adeguati e considerare le potenziali modificazioni post-traduzionali che possono spostare la banda.
• In ELISA, validare il legame utilizzando proteina o peptide ricombinante di RASSF5; notare che la natura policlonale può produrre segnali forti ma anche potenziale cross-reattività.
• Dato il contesto di soppressore tumorale e la down-regolazione nel cancro al polmone, il confronto tra lisati di tessuto normale e tumorale può fornire risultati informativi.
• Poiché RASSF5 si localizza nel citoplasma e nel citoscheletro, la frazionamento subcellulare o l'immunofluorescenza potrebbero essere considerati se l'anticorpo è validato per tali applicazioni, sebbene al momento siano elencati solo WB ed ELISA.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento.

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