Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Rbm7 (Validato KO) per WB, IP, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9CQT2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Rbm7

• Rbm7 (proteina legante l'RNA 7) è una proteina di ~30 kDa contenente un motivo di riconoscimento dell'RNA che funge da subunità legante l'RNA del complesso trimero NEXT (nuclear exosome targeting).
• Il complesso NEXT indirizza un sottoinsieme di RNA non codificanti a vita breve verso la degradazione esosomiale, svolgendo un ruolo chiave nella sorveglianza e nel ricambio di trascritti aberranti e RNA non codificanti.
• Rbm7 si lega preferenzialmente a sequenze poliuridiniche e si associa a RNA di nuova sintesi, inclusi pre-mRNA, trascritti a monte del promotore (PROMPT), RNA degli enhancer (eRNA) e prodotti estesi al 3' da piccoli RNA nucleari (snRNA).
• Partecipa alla risposta al danno al DNA (DDR) interagendo con MEPCE e LARP7, subunità centrali del complesso 7SK snRNP, portando al rilascio del fattore positivo di allungamento della trascrizione b (P-TEFb) e alla trascrizione dei geni della DDR, promuovendo così la vitalità cellulare.
• Durante la risposta allo stress, l'attivazione della via p38MAPK-MK2 diminuisce il legame di Rbm7 all'RNA e le successive attività di degradazione da parte dell'esosoma dell'RNA, modulando il ricambio del trascrittoma non codificante.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, con presenza nel nucleoplasma.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, metilazione e fosforilazione; le parole chiave evidenziano anche ruoli nella meiosi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato validato in modelli di topo knockout (KO), rendendolo adatto a confermare la specificità del bersaglio in campioni knockout vs. wild-type; includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per il Western blot (WB), una diluizione iniziale di 1:1000 è comunemente utilizzata; ottimizzare per il proprio tipo di campione. Il peso molecolare previsto è di 30 kDa; verificare la dimensione della banda con un marcatore di peso molecolare.
• La sequenza immunogena (aa 87-265) è conservata tra topo e ratto, in linea con la reattività incrociata osservata; la reattività incrociata con altre specie non è stata testata e richiede una validazione individuale.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), utilizzare un sistema di perle proteina A/G e pre-depurare i lisati; notare che le proteine leganti l'RNA possono richiedere condizioni di lisi delicate per preservare le interazioni.
• Per l'immunocolorazione (IF-P, IHC-P), potrebbe essere necessario un recupero dell'antigene; eseguire esperimenti pilota su tessuti positivi noti per ottimizzare le condizioni.
• In ELISA, considerare l'uso della proteina Rbm7 ricombinante come antigene di rivestimento per stabilire una curva standard; validare la linearità e il limite di rilevamento nella propria configurazione del saggio.

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