Anticorpo policlonale coniglio anti-RBMX/hnRNP G per WB, ELISA - P38159

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RBMX/hnRNP G

• RBMX (proteina con motivo di legame all'RNA, cromosoma X), nota anche come hnRNP G (ribonucleoproteina eterogenea nucleare G) e glicoproteina p43, è un membro della famiglia hnRNP e un'importante proteina di legame all'RNA coinvolta nella regolazione genica pre- e post-trascrizionale.
• Funziona come regolatore trascrizionale, legandosi e stimolando il promotore del gene soppressore tumorale TXNIP, suggerendo un ruolo nella soppressione tumorale. RBMX coopera anche con SAFB per attivare la trascrizione di SREBF1.
• RBMX è un componente del complesso supraspliceosoma e regola lo splicing alternativo agendo come attivatore o repressore dell'inclusione degli esoni. Ad esempio, promuove l'inclusione dell'esone 7 del gene SMN2 in modo additivo con TRA2B e reprime lo splicing dell'esone 10 di MAPT/Tau.
• La proteina si lega preferenzialmente all'RNA a filamento singolo con motivi ricchi di 5'-CC[A/C] e si associa agli mRNA nascenti trascritti dalla RNA polimerasi II. Probabilmente lega l'RNA come omodimero ed exhibits un'affinità non specifica per i pre-mRNA.
• Nel citoplasma, RBMX partecipa al traffico di TNFR1, promuovendo il clivaggio proteolitico mediato da IL-1β dei domini ectoplasmici di TNFR1 e il rilascio di vescicole simili a esosomi TNFR1 nello spazio extracellulare.
• Studi di immunofluorescenza e frazionamento subcellulare localizzano RBMX prevalentemente nel nucleo, dove interagisce con la cromatina, l'RNA nascente e i fattori di splicing.
• La profilazione dell'espressione tissutale rivela una forte espressione proteica nei cheratinociti orali normali ma solo una debole rilevazione nei carcinomi a cellule squamose orali, collegando la sua downregulazione o perdita con la progressione tumorale.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione, acetilazione, metilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, che possono regolare la sua attività, localizzazione e interazioni. Mutazioni o disregolazione di RBMX sono associate a disturbi neurologici come disabilità intellettuale, epilessia e sordità.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione amminoacidica N‑terminale 1–95 di RBMX umano espressa come proteina di fusione ricombinante. Quando si pianificano esperimenti confermativi, considerare l'uso di questo immunogeno come controllo positivo in ELISA o come peptide di blocco negli assay di competizione.
• Nel Western blotting, si prevede una banda principale vicino a 42 kDa, coerente sia con il peso molecolare previsto di ~42,3 kDa che con il peso proteico riportato di 42 kDa. Includere appropriati controlli positivi come lisati di HeLa, HEK293 o cheratinociti orali, e validare la rilevazione nella matrice campione specifica.
• Questo anticorpo policlonale è dichiarato cross-reagire con RBMX di mouse; pertanto, linee cellulari di topo o lisati tissutali possono essere valutati in parallelo per verificare la specificità e l'idoneità per gli studi su modelli murini.
• Per ELISA, considerare l'uso della proteina RBMX umana ricombinante o lisati cellulari come antigeni di rivestimento, e sondare con l'anticorpo a diluizioni determinate empiricamente. Come con qualsiasi reagente policlonale, le prestazioni possono variare tra i lotti, quindi si raccomanda la validazione all'interno del proprio sistema sperimentale.
• Data la localizzazione nucleare della proteina, le frazioni arricchite di nucleo possono migliorare la forza del segnale in WB. Inoltre, essere consapevoli delle potenziali modificazioni post‑traduzionali che potrebbero spostare il peso molecolare apparente o influenzare il legame dell'anticorpo.

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