Anticorpo policlonale coniglio anti-RBPMS per WB e ELISA - Q93062

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RBPMS

• RBPMS (RNA-binding protein with multiple splicing), noto anche come Hermes, è una proteina legante l'RNA che media la regolazione dello splicing alternativo del pre-mRNA, agendo come attivatore o repressore a seconda del trascritto bersaglio (PubMed:24860013, PubMed:26347403).
  Riferimenti correlati: PMID:24860013, PMID:26347403
• Gioca un ruolo critico nelle cellule muscolari lisce vascolari differenziate attivando un programma di splicing che influenza il citoscheletro di actina e i macchinari degli adesioni focali, in cooperazione con RBFOX2 e MBNL1/2.
• RBPMS si lega a motivi trinucleotidici CAC in tandem separati da uno spaziatore variabile (1–9 nt) o a ripetizioni dinucleotidiche CA, con una lunghezza minima di RNA di 15 nt, funzionando spesso come dimero.
• Reprime l'inclusione dell'esone 3 di TPM1 legandosi alle ripetizioni CAC e formando complessi di ordine superiore con altri regolatori dello splicing, impedendo l'assemblaggio dello spliceosoma.
• Si localizza nel nucleo e nel citoplasma, inclusi i granuli di stress e i corpi P (P-bodies), riflettendo il suo ruolo dinamico nel metabolismo dell'RNA.
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti, con i livelli più alti nel cuore, prostata, intestino tenue e crasso, e ovaio (PubMed:8855282).
  Riferimenti correlati: PMID:8855282
• Agisce come coattivatore dell'attività trascrizionale di SMAD in modo dipendente da TGFB1, potenziando la fosforilazione di SMAD2/3 e il loro accumulo nucleare (PubMed:17099224).
  Riferimenti correlati: PMID:17099224
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, come identificato dalla proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), utilizzare lisati cellulari totali da cellule muscolari lisce vascolari, cuore o altri tessuti che esprimono RBPMS. Il peso molecolare previsto è 22 kDa; viene tipicamente osservata una singola banda vicina a questa dimensione, sebbene possano apparire pattern specifici per isoforma.
• Per l'ELISA, rivestire con il frammento immunogenico ricombinante (aa 110–219) o con la proteina nativa da estratti di cellule/tessuti. Ottimizzare la concentrazione di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo di rilevazione per il miglior rapporto segnale/rumore.
• Data la reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto, validare nel sistema modello pertinente e considerare l'uso di controlli di carico abbinati per specie.
• Poiché RBPMS esiste in multiple isoforme di splicing, l'anticorpo potrebbe rilevare diverse varianti; variazioni nel peso molecolare potrebbero indicare un'espressione specifica per isoforma o una modifica.

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