Anticorpo monoclonale coniglio Anti-RCC1 per WB, IHC-P, ELISA - P18754

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di RCC1

• RCC1 agisce come fattore di rilascio del guanina-nucleotide (GEF) per la piccola GTPasi Ran, catalizzando lo scambio del GDP con GTP per regolare l'attività di Ran (PubMed:11336674, PubMed:17435751, PubMed:1944575).
  Riferimenti correlati:
  PMID:11336674, PMID:17435751, PMID:1944575

• Mantenendo un'alta concentrazione di Ran legato al GTP nel nucleo, RCC1 facilita il rilascio delle proteine carico dalle importine dopo l'importazione nucleare (PubMed:22215983).
  Riferimenti correlati:
  PMID:22215983

• Durante la mitosi, RCC1 genera Ran-GTP associato ai cromosomi, essenziale per la corretta formazione del fuso mitotico e la progressione della mitosi (PubMed:12194828, PubMed:17435751, PubMed:22215983).
  Riferimenti correlati:
  PMID:12194828, PMID:17435751, PMID:22215983

• RCC1 si lega direttamente ai nucleosomi e al DNA a doppio filamento, ancorando la sua attività GEF alla cromatina (PubMed:17435751, PubMed:18762580).
  Riferimenti correlati:
  PMID:17435751, PMID:18762580

• Regola l'inizio della condensazione cromosomica durante la fase S, garantendo una corretta progressione del ciclo cellulare (PubMed:3678831).
  Riferimenti correlati:
  PMID:3678831

• La proteina contiene sette ripetizioni RCC1 in tandem, che formano una struttura a sette pale a β-propeller, e subisce splicing alternativo per generare più isoforme.

• Le modifiche post-traduzionali di RCC1 includono fosforilazione e metilazione, che possono modulare la sua attività e le sue interazioni.

• Subcellolarmente, RCC1 è prevalentemente nucleare dove si associa alla cromatina, ma può essere rilevato anche nel citoplasma.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 1-100 di RCC1 umano; questa regione N-terminale è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, il che può spiegare la reattività crociata osservata.
• Per il Western blotting, è prevista una banda corrispondente al peso molecolare previsto di ~45 kDa; confermare la specificità utilizzando controlli positivi come lisati cellulari totali di HeLa o HEK293.
• Nell'istochimica immunitaria su sezioni paraffinate, si consiglia il recupero dell'antigene e potrebbe essere necessaria una titolazione per ottimizzare il segnale, a causa della natura legata alla cromatina del bersaglio.
• Per l'ELISA, lo stesso immunogeno peptidico può essere utilizzato come standard di rivestimento, oppure la proteina RCC1 ricombinante può essere utilizzata per lo sviluppo di saggi quantitativi.

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