Anticorpo policlonale coniglio anti-REST/NRSF per WB, ELISA - Q13127

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di REST/NRSF

• Agisce come repressore trascrizionale che lega l'elemento silenziatore neuronale-restrittivo (NRSE) e recluta i corepressori SIN3A e RCOR1, portando al reclutamento delle istone deacetilasi e al silenziamento dei geni neuronali nelle cellule non neuronali. Riferimenti correlati: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093

• Media la modificazione della cromatina tramite il complesso BHC, che deacetila e demetila le istoni nei siti RE1/NRSE per mantenere il silenziamento genico.

• Reprime la trascrizione tramite il reclutamento dipendente da CDYL dell'istone metiltransferasi EHMT2, un meccanismo che può sopprimere la trasformazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:19061646

• L'attività repressiva è antagonizzata dall'eterodimerizzazione con l'isoforma 3 splicing alternativo, che previene il legame con NRSE e dereprime i geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:11779185

• Mantiene lo stato quiescente delle cellule staminali neurali adulte reprimendo i geni neuronali; la dissociazione da NRSE in seguito a segnali di differenziazione permette la specificazione neuronale. Riferimenti correlati: PMID:21258371

• Agisce come repressore chiave dell'espressione genica in condizioni ipossiche e contribuisce alla resistenza allo stress e alla regolazione della morte cellulare nel cervello invecchiato. Riferimenti correlati: PMID:27531581, PMID:24670762

• Espressione tissutale: rilevata nei neuroni della corteccia prefrontale, dell'ippocampo e del cervelletto; i livelli nucleari sono ridotti nel morbo di Alzheimer e nel morbo di Parkinson, con aggregazione patologica nei corpi di Lewy nei neuroni dopaminergici. Riferimenti correlati: PMID:24670762, PMID:30684677

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 25–130 di REST umano, una regione N-terminale a monte dei domini a dito di zinco. Gli utenti devono verificare che il loro sistema sperimentale preservi questo epitopo.
• Per Western blot, iniziare con una diluizione 1:500–1:2000 e validare utilizzando lisati di linee cellulari non neuronali che esprimono REST (es. HeLa) insieme ai controlli appropriati.
• Per ELISA, la proteina REST ricombinante o il peptide che copre la regione dell'immunogeno possono essere utilizzati come controllo positivo per valutare il legame dell'anticorpo.
• Sebbene sia riportata la reattività incrociata con topo e ratto, si consiglia l'allineamento della sequenza tra specie nella regione dell'immunogeno per confermare la reattività attesa.
• A causa dell'elevato peso molecolare (~122 kDa), assicurarsi che le condizioni di elettroforesi su gel siano ottimizzate per proteine ad alto peso molecolare e considerare tempi di trasferimento prolungati per la WB.

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