Anticorpo monoclonale Anti-Ret di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P07949

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Ret

• Ret è una tirosin-chinasi recettoriale codificata dal proto-oncogene RET (noto anche come CDHF12, CDHR16, PTC) e appartiene alla superfamiglia delle caderine.
• L'attivazione del recettore richiede il legame dei ligandi della famiglia GDNF (GDNF, NRTN, ARTN, PSPN, GDF15) a specifici corecettori GDNFR-α, portando all'autofosforilazione e all'attivazione a valle delle vie di segnalazione MAPK e AKT. Riferimenti correlati: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:24560924
• Funziona come recettore di dipendenza nei somatotropi ipofisari, promuovendo la sopravvivenza in presenza di GDNF ma innescando l'apoptosi in seguito al ritiro del ligando. Riferimenti correlati: PMID:20616503, PMID:21994944
• Coinvolto nell'organogenesi: necessario per lo sviluppo del sistema nervoso enterico, dei reni e dei tessuti linfoidi associati all'intestino (per similarità), e innesca la differenziazione dei meccanocettori ad adattamento rapido. Riferimenti correlati: PMID:20064382
• Media le risposte avversive indotte da GDF15 nel tronco encefalico, inclusi nausea e perdita di appetito, tramite il corecettore GFRAL. Riferimenti correlati: PMID:28846097, PMID:28846099, PMID:28953886
• Regola l'adesione e la migrazione cellulare attraverso meccanismi di clivaggio mediato da caspasi e dipendenti da integrine. Riferimenti correlati: PMID:20702524, PMID:21357690
• Fosforila PTK2/FAK1 dopo l'attivazione. Riferimenti correlati: PMID:21454698
• Lo splicing alternativo genera isoforme con diversa potenza di segnalazione; l'isoforma 1 induce un'attivazione MAPK più forte dell'isoforma 2. Mutazioni in RET sono associate alla neoplasia endocrina multipla di tipo 2 (MEN2A/MEN2B) e alla malattia di Hirschsprung.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è rivolto contro un peptide C-terminale (aa 1000–1100) all'interno del dominio chinasico; pertanto l'anticorpo potrebbe riconoscere Ret a lunghezza intera (~124 kDa) e possibilmente frammenti C-terminali o isoforme clivate.
• Per il Western blotting, considerare l'uso di condizioni riducenti e validare il peso molecolare atteso; tenere presente che la glicosilazione e la processazione proteolitica possono produrre bande aggiuntive.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, prevedere una colorazione di membrana ed endosomiale; ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per il proprio tipo cellulare.
• Includere controlli appropriati come linee cellulari note per esprimere Ret (es. cellule di cancro neuroendocrino o tiroideo) e campioni trattati con imatinib per confermare la specificità.
• Per applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare una strategia a coppia abbinata con un anticorpo di rilevazione per una sensibilità ottimale.

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