Anticorpo policlonale coniglio Anti-RFC1 per WB, IF/ICC e ELISA - P35251

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RFC1

• RFC1 codifica la subunità grande (140 kDa) del complesso eteropentamerico del fattore di replicazione C (RFC), noto anche come attivatore 1.
• Il complesso RFC è necessario per l'allungamento dei modelli di DNA primerizzati dalle DNA polimerasi delta e epsilon, e carica PCNA sul DNA in modo dipendente da ATP (PubMed:9488738).
  Riferimenti correlati:
  PMID:9488738
• Questa subunità lega specificamente la giunzione primer-modello e può interagire sia con il DNA a singolo che a doppio filamento, oltre che con sequenze ricche di GA incluso l'elemento di trascrizione PO-B, suggerendo un doppio ruolo nella replicazione del DNA e nella regolazione della trascrizione.
• RFC1 è localizzato nel nucleo ed è ampiamente espresso in tutti i tessuti umani ad eccezione della placenta.
• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e ubiquitinazione (legame isopeptidico), come indicato da studi proteomici su larga scala.
• Le mutazioni in RFC1 sono associate alla sindrome da atassia cerebellare, neuropatia e areflessia vestibolare (CANVAS), ampliando la sua rilevanza clinica oltre il metabolismo centrale del DNA.
• Lo splicing alternativo genera molteplici varianti di trascritto, contribuendo alla diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per Western blot, aspettarsi una banda intorno ai 128 kDa. Utilizzare SDS-PAGE al 6-8% per una separazione ottimale delle proteine ad alto peso molecolare.
• Per immunofluorescenza/ICC, includere una colorazione nucleare di contrasto (ad es. DAPI) e confermare la localizzazione nucleare. Le condizioni di permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione.
• ELISA: L'anticorpo può essere utilizzato per rilevare RFC1 ricombinante o endogeno; titrare appropriatamente.
• L'allineamento di sequenza dell'immunogeno (aa 400-700) tra uomo, topo e ratto indica un'elevata conservazione, che supporta la reattività crociata riportata; in ogni caso, convalidare nella vostra specifica configurazione sperimentale.

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