Anticorpo Monoclonale Anti-RGAP1 per WB, ELISA - Q9H0H5

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RGAP1

• RGAP1 (Rac GTPase-activating protein 1), noto anche come CYK4, MgcRacGAP o HsCYK-4, è codificato dal gene RACGAP1 e funziona principalmente come proteina attivatrice delle GTPasi per le GTPasi della famiglia Rho.
• È un componente fondamentale del complesso centralspindlin, un complesso di segnalazione dipendente dai microtubuli e mediato da Rho, essenziale per la formazione dell'anello contrattile di miosina durante la citochinesi. Si lega sequenzialmente a ECT2 e RAB11FIP3 per regolare l'invaginazione del solco di scissione e l'ablazione. Riferimenti correlati: PMID:18511905
• Oltre al suo ruolo strutturale, RGAP1 controlla la crescita cellulare e la differenziazione delle cellule ematopoietiche attraverso meccanismi indipendenti dall'attività GTPasi di Rac (PubMed:10979956). È anche critico per l'eritropoiesi (PubMed:34818416). Riferimenti correlati: PMID:10979956 PMID:34818416
• La proteina exhibits una forte attività di attivazione GTPasi verso CDC42 e RAC1, con attività più debole contro RHOA, implicandola nel rimodellamento del citoscheletro di actina e nella polarità cellulare.
• A livello subcellulare, RGAP1 si localizza dinamicamente nel nucleo, citoplasma, fuso, corpo intermedio e solco di scissione durante la divisione cellulare; si trova anche nell'acrosoma delle cellule germinali maschili.
• L'espressione è più alta nel testicolo, timo e placenta, è regolata dal ciclo cellulare con livelli massimi nella fase G2/M, e può contribuire alla spermatogenesi e allo sviluppo neuronale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide N‑terminale (aa 1–100) di RGAP1 umano. A causa dell'alta conservazione della sequenza, la reattività crociata con specie non umane dovrebbe essere validata nella matrice di campione pertinente.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~71 kDa. Considerare la sincronizzazione delle cellule coltivate in fase G2/M per arricchire RGAP1, poiché la sua espressione raggiunge il picco durante la mitosi.
• Nelle applicazioni ELISA, verificare che l'antigene di rivestimento o il formato di rilevamento non competa stericamente con l'epitopo peptidico riconosciuto da questo anticorpo monoclonale.
• Dato che RGAP1 risiede in più compartimenti subcellulari (nucleo, citoplasma, corpo intermedio), la frazionazione cellulare o tamponi di lisi specifici possono migliorare il rilevamento del segnale nel WB.

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