Anticorpo policlonale anti-RheB coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q15382

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RheB

• La proteina legante il GTP RheB (Ras omologo arricchito nel cervello), nota anche come RHEB2, è una piccola GTPasi che funge da attivatore allosterico del complesso mTORC1 (PubMed:12172553, PubMed:12271141, PubMed:12842888). Riferimenti correlati: PMID:12172553, PMID:12271141, PMID:12842888
• In risposta ai nutrienti, ai fattori di crescita o agli amminoacidi, RheB attiva mTOR inducendo un cambiamento conformazionale che potenzia la fosforilazione dei bersagli a valle RPS6KB1/S6K1 e EIF4EBP1/4E-BP1 (PubMed:29236692, PubMed:33157014). Riferimenti correlati: PMID:29236692, PMID:33157014
• Rheb è necessario per la localizzazione lisosomiale del complesso TSC-TBC; in condizioni di digiuno, viene inattivato da TSC-TBC per prevenire l'attivazione di mTORC1 (PubMed:24529379, PubMed:33157014). Riferimenti correlati: PMID:24529379, PMID:33157014
• Possiede una bassa attività GTPasi intrinseca (PubMed:15340059). Riferimenti correlati: PMID:15340059
• A livello subcellulare, RheB si localizza al sistema delle membrane endomembranari, inclusi lisosomi, membrane dell'apparato di Golgi e del RE, nonché nel citosol.
• L'espressione tissutale è ubiquitaria, con i livelli più alti nei muscoli scheletrico e cardiaco (PubMed:8543055).
• Le modifiche post-traduzionali includono prenilazione (lipoproteina), metilazione, fosforilazione e formazione di legami isopeptidici (coniugazione Ubl).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 20 kDa; considerare l'uso di controlli positivi da lisati cellulari umani, murini o di ratto, in particolare quelli con alta espressione di RheB (es. tessuti muscolari).
• Nell'immunocitochimica, convalidare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione; RheB si localizza alle strutture delle membrane endomembranari, risultando in una colorazione punteggiata.
• Per l'ELISA, è possibile esplorare formati diretti o a sandwich; la reattività crociata con mouse e ratto offre flessibilità nello sviluppo di saggi multi-specie.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata; passaggi di pre-adsorbimento possono ridurre il legame non specifico se necessario.

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