Anticorpo policlonale anti-RhoB per WB, ELISA - P62745

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RhoB

• RhoB è una proteina legante il GTP correlata a Rho che media l'apoptosi nelle cellule trasformate neoplasticamente dopo il danno al DNA ed è necessaria per la morte cellulare indotta da stress genotossico nelle cellule del cancro al seno.
• Svolge un ruolo negativo nella tumorigenesi; la delezione di RhoB promuove la formazione di tumori, evidenziando la sua funzione di soppressore tumorale.
• RhoB è coinvolto nel traffico intracellulare delle proteine, incluso il targeting di PKN1 agli endosomi e la regolazione del traffico del recettore EGF dagli endosomi tardivi ai lisosomi.
• È necessario per la stabilità e il traffico nucleare di AKT1/AKT, promuovendo così la sopravvivenza delle cellule endoteliali durante lo sviluppo vascolare.
• RhoB funge da segnale dipendente dai microtubuli necessario per la formazione dell'anello contrattile di miosina durante la citochinesi del ciclo cellulare.
• La proteina si localizza in siti multipli, inclusa la membrana degli endosomi tardivi, la membrana cellulare, il nucleo e il solco di scissione.
• Le modifiche post-traduzionali di RhoB includono prenilazione, palmitoilazione, fosforilazione e metilazione, che regolano la sua localizzazione subcellulare e la sua funzione.
• È coinvolto in processi biologici chiave come l'angiogenesi, l'adesione cellulare, la differenziazione e l'apoptosi, con la sua attività modulata dal legame e dall'idrolisi del GTP.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 100-190 di RhoB umano; considerare l'uso di saggi di competizione peptidica per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per il Western blotting, è prevista una banda di circa 22 kDa. Convalidare il rilevamento in campioni di controllo positivi e negativi pertinenti.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo per ottenere rapporti segnale-rumore ottimali.
• L'anticorpo cross-reagisce con RhoB di topo e ratto, probabilmente a causa dell'alta conservazione della sequenza; verificare le prestazioni nel proprio sistema sperimentale specifico.
• Il pre-adsorbimento con il peptide di immunizzazione può essere utile per controllare il legame non specifico in campioni complessi.

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