Anticorpo policlonale di coniglio anti-RhoC (validato con KO) per WB, ELISA - P08134

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RhoC

• RhoC è una proteina legante il GTP correlata a Rho, nota anche con gli alias H9, ARH9, ARHC, RHOH9 e oC. Appartiene alla famiglia delle piccole GTPasi Rho.
• Funziona come interruttore molecolare alternando uno stato inattivo legato al GDP e uno stato attivo legato al GTP, regolando gli effettori a valle coinvolti nelle dinamiche del citoscheletro.
• Regola le vie di trasduzione del segnale che collegano i recettori della membrana plasmatica all'assemblaggio delle adesioni focali e delle fibre di stress di actina, influenzando così la morfologia e la migrazione cellulare.
• Agisce come segnale dipendente dai microtubuli, necessario per la formazione dell'anello contrattile di miosina durante la citocinesi, garantendo una corretta divisione cellulare.
• Regola la formazione delle giunzioni apicali nelle cellule epiteliali bronchiali, contribuendo al mantenimento dell'integrità della barriera epiteliale.
• Localizzazione subcellulare: associata prevalentemente alla membrana cellulare e arricchita nel solco di clivaggio durante la mitosi, in linea con i suoi ruoli nella segnalazione dei recettori di membrana e nella citocinesi.
• Le modifiche post-traduzionali includono la prenilazione presso il motivo CAAX C-terminale per l'ancoraggio alla membrana, l'ADP-ribosilazione, la metilazione e la potenziale glicosilazione, che modulano la sua attività e localizzazione.
• È coinvolta in processi cellulari chiave quali l'organizzazione del citoscheletro, la proliferazione cellulare e la migrazione; un'attività aberrante di RhoC è stata associata all'invasione e alla metastasi tumorale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-193 della RhoC umana e può indurre anticorpi in grado di riconoscere sia le conformazioni legate al GTP sia quelle legate al GDP.
• Per il Western blot, prevedere una banda specifica a circa 22 kDa; prendere in considerazione l'utilizzo di linee cellulari positive per RhoC, come HeLa o A549, come controlli positivi.
• Poiché l'anticorpo è validato con KO, per i test quantitativi si raccomanda di confermarne la specificità in campioni knockout rispetto a campioni wild-type.
• Per l'ELISA, valutare il rivestimento diretto con l'immunogeno oppure implementare un formato sandwich con un anticorpo di rilevazione abbinato; la reattività crociata con la RhoC di ratto deve essere verificata empiricamente.
• Data l'elevata omologia di sequenza tra i membri della famiglia Rho, testare la potenziale reattività crociata con RhoA e RhoB nel sistema sperimentale dell'utilizzatore.

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