Anticorpo policlonale Anti-RHOT1/MIRO1 per WB, ELISA - Q8IXI2

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RHOT1/MIRO1

• RHOT1 (noto anche come MIRO1, ARHT1) codifica per la GTPasi Rho mitocondriale 1, una nucleoside-trifosfatasi (NTPasi) mitocondriale atipica critica per il traffico mitocondriale e la distribuzione subcellulare (PubMed:12482879, PubMed:16630562, PubMed:22396657). Riferimenti correlati: PMID:12482879 PMID:16630562 PMID:22396657
• La proteina si localizza sulla membrana esterna mitocondriale ed è coinvolta nel trasporto mitocondriale anterogrado, collegando i mitocondri alle proteine motorie tramite complessi adattatori.
• RHOT1/MIRO1 possiede attività GTPasica e può idrolizzare GTP, ATP e UTP, agendo come un regolatore chiave della dinamica mitocondriale (PubMed:30513825). Riferimenti correlati: PMID:30513825
• Promuove la fissione mitocondriale in condizioni di alto calcio, agendo come un interruttore sensibile al calcio nei cambiamenti di forma mitocondriale (PubMed:27716788). Riferimenti correlati: PMID:27716788
• Appartiene alla famiglia delle piccole GTPasi Rho, ma è classificata come atipica a causa della sua unica architettura di dominio e del targeting mitocondriale.
• Espressa ubiquitariamente, con livelli elevati nel cuore e nel muscolo scheletrico, riflettendo il suo ruolo nei tessuti con elevate richieste energetiche.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e coniugazione all'ubiquitina (legame isopeptidico), che possono modulare la sua attività e stabilità.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 310–590, una regione che probabilmente attraversa il dominio GTPasico e la coda C-terminale; questo epitopo potrebbe essere conservato tra le specie, supportando la reattività osservata nell'umano, topo e ratto.
• Per il Western blot, RHOT1/MIRO1 endogeno migra a circa 71 kDa; considerare il caricamento di una frazione arricchita di mitocondri per potenziare il segnale. Validare la specificità dell'anticorpo con controlli di knockdown mediante siRNA o knockout se disponibili.
• Nell'ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come antigene di rivestimento o standard di cattura; la reattività crociata con GTPasi Rho correlate dovrebbe essere valutata a causa della natura policlonale.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, possono verificarsi variazioni da lotto a lotto; includere appropriati controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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