Anticorpo Monoclonale Anti-RING1B/RNF2 per WB, IP ed ELISA - Q99496

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RING1B/RNF2

• RING1B/RNF2, noto anche come RING2, RING1b o BAP-1, è una ligasi E3 ubiquitina-proteica che catalizza la mono-ubiquitinazione dell'istone H2A alla Lis-119 (H2AK119Ub), una modifica chiave per la repressione trascrizionale epigenetica e l'inattivazione del cromosoma X. Riferimenti correlati: PMID:15386022 PMID:16359901 PMID:21772249
• È un componente essenziale del complesso di repressione Polycomb 1 (PRC1), che mantiene lo stato di silenzioso dei geni dello sviluppo, inclusi i cluster Hox, attraverso la modificazione della cromatina. Riferimenti correlati: PMID:16359901 PMID:26151332
• L'attività ligasi E3 di RING1B/RNF2 è potenziata dalla subunità PRC1 BMI1/PCGF4. Riferimenti correlati: PMID:21772249
• RNF2 si localizza prevalentemente nel nucleo ma può essere trovato anche nel citoplasma e associato ai cromosomi, riflettendo il suo ruolo dinamico nella regolazione della cromatina.
• La proteina contiene un dominio a dito di zinco di tipo RING ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono modulare la sua funzione.
• RING1B/RNF2 è stato implicato nell'associazione cromosomica dipendente dal ciclo cellulare ed è negativamente regolato da AURKB nei linfociti a riposo per mantenere la trascrizione.
• Inoltre, agisce come regolatore negativo dell'autofagia ubiquitinando AMBRA1, mirandola per la degradazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico all'interno degli amminoacidi 100–200 di RING1B/RNF2 umano; questa regione è prevista essere accessibile in superficie basandosi su modelli strutturali e dovrebbe produrre anticorpi che riconoscono le conformazioni native della proteina nell'immunoprecipitazione (IP) e nell'ELISA.
• Per il western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di ~38 kDa; considerare l'uso di marcatori appropriati per la scala proteica e verificare la specificità della banda in lisati cellulari umani, di topo e di ratto pertinenti.
• Negli esperimenti di IP, la pre-pulizia dei lisati e l'ottimizzazione dei rapporti anticorpo-proteina possono aiutare a minimizzare il fondo; la reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto consente studi comparativi.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo utilizzando proteine ricombinanti o standard peptidici per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali; notare che questo anticorpo è monoclonale e può esibire un'elevata specificità.

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