Anticorpo policlonale Anti-RIP3/RIPK3 per IHC-P ed ELISA - Q9Y572

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RIP3

• RIP3 (chinasi proteica serina/treonina interagente con il recettore 3), nota anche come RIPK3, è una chinasi serina/treonina che attiva sia la necroptosi che l'apoptosi, due vie parallele di morte cellulare programmata. Riferimenti correlati: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• Upon activation by ZBP1, RIPK3 forms a necrosis-inducing complex and phosphorylates MLKL, leading to plasma membrane permeabilization and necroptotic cell death. Riferimenti correlati: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• RIPK3 regola anche l'apoptosi estrinseca attraverso un meccanismo dipendente da RIPK1, FADD e CASP8, indipendente da MLKL e dalla sua stessa attività chinasica.
• La proteina si localizza prevalentemente nel citosol ma può essere trovata anche nel nucleo, dove media la necroptosi nucleare in risposta a infezioni virali come gli ortomixovirus.
• RIPK3 è altamente espresso nel pancreas e rilevato a livelli inferiori nel cuore, placenta, polmone e rene; la sua espressione è significativamente aumentata nei tumori del colon e del polmone.
• In certi tipi cellulari, RIPK3 limita la replicazione virale attraverso vie indipendenti dalla morte, ad esempio up-regolando ACOD1/IRG1 e la sintesi di itaconato durante l'infezione da virus Zika.
• RIPK3 si lega e potenzia l'attività degli enzimi metabolici GLUL, GLUD1 e PYGL, stimolando potenzialmente il ciclo dell'acido tricarbossilico, la fosforilazione ossidativa e la produzione di ROS. Riferimenti correlati: PMID:19498109
• La chinasi subisce fosforilazione, ubiquitinazione e formazione di legami isopeptidici, ed è soggetta a splicing alternativo, contribuendo alla diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale è prodotto contro un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 410-518 (regione C-terminale) di RIP3 umano. Ci si aspetta che riconosca la RIP3 a lunghezza intera e possa anche rilevare varianti di splicing che contengono questo epitopo.
• Per IHC-P, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di recupero dell'antigene (es. tamponi citrato o EDTA mediati dal calore) e validare la specificità della colorazione utilizzando controlli tissutali appropriati (positivi e negativi) e, se possibile, pre-assorbimento con il peptide immunogeno.
• Nell'ELISA, assicurarsi che l'antigene di rivestimento corrisponda alla regione immunogenica o utilizzare la proteina ricombinante a lunghezza intera. Verificare la coerenza tra lotti titolando l'anticorpo rispetto a uno standard noto.
• Come reagente policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; includere riferimenti interni quando si confrontano i risultati tra esperimenti diversi.

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