Anticorpo Monoclonale Anti-RIPK1/RIP per WB, IP, ELISA - Q13546

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della RIPK1

• La RIPK1, nota anche come RIP1 o proteina RIP per la morte cellulare, è una serina-treonina chinasi che agisce come regolatore critico dell'apoptosi mediata da TNF, della necroptosi e della segnalazione infiammatoria (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Riferimenti correlati: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280
• Presenta funzioni dipendenti dall'attività chinasica nella morte cellulare e funzioni da scaffold indipendenti dall'attività chinasica nella sopravvivenza cellulare, inclusa l'attivazione della via canonica NF-kappa-B (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Riferimenti correlati: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513
• La RIPK1 regola l'assemblaggio di due complessi inducenti la morte: il complesso IIa (RIPK1-FADD-CASP8) per l'apoptosi e il complesso IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) per la necroptosi.
• Inibisce la necroptosi dipendente da RIPK3 reclutando CASP8 tramite FADD, che taglia RIPK1, limitando così la necroptosi indotta da TNF (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Riferimenti correlati: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:29440439
• La RIPK1 è localizzata principalmente nel citoplasma e sulla membrana cellulare, coerentemente con il suo ruolo nella trasduzione del segnale TNFR1.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, ubiquitinazione (legame isopeptidico) e taglio proteolitico da parte di CASP8, che regolano le sue funzioni pro-morte e pro-sopravvivenza.
• Inoltre promuove la trascrizione di citochine pro-infiammatorie come l'IL-6, collegando la morte cellulare alle risposte immunitarie (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Riferimenti correlati: PMID:31827280, PMID:31827281

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 289-490 della RIPK1 umana, una regione che comprende parte del dominio chinasi; questo progetto può favorire la rilevazione sia della proteina full-length che dei frammenti contenenti il dominio chinasi.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda intorno ai 76 kDa. Si consiglia di includere controlli appropriati per tenere conto dei prodotti di taglio che possono formarsi durante l'apoptosi o la necroptosi.
• Nell'immunoprecipitazione, convalidare le prestazioni dell'anticorpo con interattori noti della RIPK1 come TRADD o FADD in condizioni di stimolazione appropriate (es. trattamento con TNF).
• Gli esperimenti ELISA possono essere ottimizzati per la quantificazione della RIPK1 in lisati cellulari o omogeneizzati di tessuto; la reattività incrociata con altri membri della famiglia RIP deve essere valutata.

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