Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-RIPK1/RIP (Validato KO) per WB, IP, ELISA - Q13546

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RIPK1

• RIPK1 (nota anche come RIP, RIP1, proteina di morte cellulare RIP) è una serina-treonina chinasi codificata dal gene RIPK1 nell'uomo. Lo splicing alternativo produce isoforme con pesi molecolari di circa 76 e 71 kDa.
• In quanto regolatore chiave della segnalazione del fattore di necrosi tumorale (TNF), RIPK1 controlla l'apoptosi, la necroptosi e le vie infiammatorie (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Riferimenti correlati: PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• RIPK1 ha funzioni duali: agisce come impalcatura indipendente dall'attività chinasi nel complesso I del TNF-R1 per promuovere l'attivazione di NF-κB e la sopravvivenza cellulare, mentre la sua attività chinasi è necessaria per guidare il complesso IIa pro-morte (apoptosi) e IIb (necroptosi) (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Riferimenti correlati: PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• Nella necroptosi, RIPK1 agisce come inibitore della necroptosi mediata da RIPK3 facilitando il reclutamento e l'attivazione di caspase‑8 dipendente da FADD, che scinde RIPK1 (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Riferimenti correlati: PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:29440439
• RIPK1 contribuisce anche all'infiammazione promuovendo la produzione trascrizionale di citochine pro-infiammatorie come l'interleuchina‑6 (IL6) (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Riferimenti correlati: PMID:31827280 PMID:31827281
• La chinasi fosforila bersagli a valle tra cui RIPK3 (PubMed:19524513) e l'attivatore della via MAP3K5 DAB2IP a Ser‑728 (PubMed:15310755, PubMed:17389591). Riferimenti correlati: PMID:19524513 PMID:15310755 PMID:17389591
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, con un'ulteriore associazione alla membrana cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali di RIPK1 includono fosforilazione, ubiquitinazione e glicosilazione; mutazioni in RIPK1 sono associate a malattie autoinfiammatorie.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (amminoacidi 465–671) di RIPK1 umano; questa regione si trova a valle del dominio chinasi e può riconoscere entrambe le isoforme riportate.
• Per il Western blot (WB), RIPK1 endogeno tipicamente migra come un doppietto intorno a 76 e 71 kDa; a causa di modifiche post-traduzionali e formazione di complessi, possono apparire bande aggiuntive.
• La validazione KO conferma la specificità dell'anticorpo; si raccomanda di includere lisati da cellule knockout per RIPK1 come controllo negativo.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'ELISA, le concentrazioni ottimali dell'anticorpo dovrebbero essere determinate empiricamente nel sistema sperimentale rilevante.

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