Anticorpo policlonale coniglio anti-RIPK1/RIP per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q13546

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RIPK1/RIP

• RIPK1 (chinasi 1 interagente con il recettore serina/treonina) è un regolatore chiave dell'apoptosi mediata dal fattore di necrosi tumorale (TNF), della necroptosi e delle vie infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• Esibisce funzioni dipendenti dall'attività chinasica che regolano la morte cellulare e funzioni scaffold indipendenti dalla chinasi che promuovono la sopravvivenza cellulare tramite l'attivazione canonica di NF-kappa-B. Riferimenti correlati: PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• Dopo l'attivazione, RIPK1 regola l'assemblaggio di complessi induttori di morte: il complesso IIa (RIPK1-FADD-CASP8) che guida l'apoptosi e il complesso IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) che guida la necroptosi.
• RIPK1 inibisce la necroptosi mediata da RIPK3 reclutando FADD e CASP8, che clivano RIPK1 per limitare la necroptosi indotta da TNF. Riferimenti correlati: PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:29440439
• RIPK1 promuove la produzione trascrizionale di citochine pro-infiammatorie, come l'interleuchina-6 (IL6). Riferimenti correlati: PMID:31827280 PMID:31827281
• Si localizza nel citoplasma e nella membrana cellulare; le varianti genetiche sono associate a disturbi autoinfiammatori e immunodeficienza (IMD57).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una banda predominante vicino a 76 kDa; validare la specificità nei lisati di controllo positivo da cellule umane, di topo o di ratto.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene; testare su sezioni di tessuto pertinenti come organi linfoidi o biopsie tumorali dove è prevista l'espressione di RIPK1.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare protocolli di fissazione e permeabilizzazione appropriati per preservare la localizzazione citoplasmica e di membrana; includere controlli isotipici.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), utilizzare tamponi di lisi delicati per mantenere le interazioni proteiche; verificare l'arricchimento tramite immunoblotting.
• Essendo un anticorpo policlonale, confermare la coerenza lotto-per-lotto mediante test paralleli; titolare la concentrazione dell'anticorpo per ogni applicazione.
• L'immunogeno copre gli amminoacidi 100–200; notare che gli isoforme di splicing alternativi possono variare in questa regione; confermare la disponibilità dell'epitopo nel sistema di interesse.
• La reattività crociata tra umano, topo e ratto consente studi multispecie; validare le prestazioni nel contesto del campione specifico di ogni specie.

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