Anticorpo policlonale anti-RIPK2 per WB, ELISA - O43353

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RIPK2

• RIPK2 (chinasi 2 della serina/treonina-proteina interagente con il recettore), nota anche come RICK, RIP2, CARDIAK e CARD3, è una chinasi a doppia specificità essenziale per la trasduzione dei segnali immunitari innati e adattativi. Riferimenti correlati: PMID:14638696 PMID:17054981 PMID:21123652
• In seguito al rilevamento del peptidoglicano batterico, NOD1 e NOD2 reclutano RIPK2 attraverso interazioni omotipiche CARD-CARD, attivando la formazione di filamenti di RIPK2 che fungono da piattaforme di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:17054981 PMID:17562858 PMID:21123652
• RIPK2 reclutata subisce poliubiquitinazione legata a K63 da parte di XIAP/BIRC2/BIRC3 e ubiquitinazione lineare legata a M1 da parte del complesso LUBAC, trasformandosi in una piattaforma per gli effettori a valle. Riferimenti correlati: PMID:22607974 PMID:28545134 PMID:29452636
• Queste catene di poliubiquitina reclutano l'adattatore IKBKG/NEMO e il complesso TAB2/TAB3-TAK1, inducendo la fosforilazione di IKK e la successiva traslocazione nucleare di NF-κB e l'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:17562858 PMID:22607974 PMID:29452636 PMID:18079694
• L'attività chinasica di RIPK2 non è indispensabile per la segnalazione NOD1/NOD2; il suo ruolo principale è quello di proteina scaffold. Riferimenti correlati: PMID:29452636 PMID:30026309
• RIPK2 si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare e nel reticolo endoplasmatico ed è ampiamente espressa nei tessuti, tra cui cuore, cervello, placenta, polmone, leucociti, milza e rene.
• Nell'immunità adattativa, RIPK2 partecipa alla segnalazione del recettore delle cellule T promuovendo la fosforilazione di BCL10 e l'attivazione di NF-κB. Riferimenti correlati: PMID:14638696
• RIPK2 media inoltre la fosforilazione tirosinica di ARHGEF2 dipendente da Src nella segnalazione NOD2 e regola l'inattivazione di RHOA a valle di NGFR. Riferimenti correlati: PMID:21887730 PMID:26646181

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la proteina RIPK2 a lunghezza intera (aa 1–540), il che può determinare il riconoscimento di più isoforme o forme modificate post-traduzionalmente; confermare la banda di interesse (prevista a circa 61 kDa) utilizzando controlli appropriati.
• Per il Western blot, convalidare la diluizione ottimale dell'anticorpo per il campione e il sistema di rilevamento specifici; i livelli di espressione endogena di RIPK2 possono variare tra diversi tipi di cellule e tessuti.
• A causa della natura policlonale, è possibile una reattività crociata; verificare la specificità utilizzando campioni con RIPK2 knockout o knockdown oppure mediante blocco con peptide.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo contro l'immunogeno ricombinante o il bersaglio nativo per determinare l'intervallo lineare di rilevamento.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con RIPK2 di topo e ratto, ma si raccomanda un allineamento delle sequenze quando lo si estende ad altre specie.

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