Anticorpo policlonale di coniglio anti-RNF149 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8NC42

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RNF149

• Identità e alias della proteina: Ligasi E3 ubiquitina-proteina RNF149, indicata anche come proteina 2 transattivata dalla DNA polimerasi (DNAPTP2) e proteina 149 con dito RING.
• Funzione principale: Agisce come ligasi E3 ubiquitina-proteina, mediando l'ubiquitinazione di BRAF e indirizzandolo alla degradazione proteasomica.
• Dominio e classificazione della proteina: Contiene un dominio a dito di zinco di tipo RING, che la classifica come transferasi E3 dell'ubiquitina di tipo RING coinvolta nella via di coniugazione dell'ubiquitina.
• Localizzazione subcellulare: È predetta come proteina di membrana, dotata di un peptide segnale e di un'elica transmembrana che la ancora alle membrane cellulari.
• Modifiche post-traduzionali: Identificata come glicoproteina e fosfoproteina; il legame con gli ioni zinco è essenziale per la struttura del dito RING e per l'attività catalitica.
• Peso molecolare: La massa molecolare prevista è di circa 43 kDa (UniProt: 43.165 Da), in accordo con il peso della proteina osservato.
• Identificazione proteomica: Rilevata a livello proteico mediante analisi proteomiche.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 221–400) corrisponde probabilmente a una regione citoplasmatica; valutare se l'epitopo sia accessibile nella preparazione del campione (ad es. condizioni denaturanti rispetto a condizioni native per WB/IHC).
• Per il Western blot, attendersi una banda intorno a 43 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo appropriati provenienti da linee cellulari umane, murine o di ratto.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), eseguire il recupero antigenico secondo necessità e includere controlli negativi (ad es. blocco con peptide o cellule knockout) per confermare la specificità.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale di coniglio, può verificarsi variabilità tra lotti. Titolare l'anticorpo per ciascuna applicazione e validarlo nel proprio sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione; se si sviluppa un saggio sandwich, valutare l'abbinamento con un anticorpo monoclonale di cattura validato.

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