Anticorpo policlonale anti-RNF168 per WB, ELISA - Q8IYW5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RNF168

• Ligasi E3 ubiquitina-proteica che catalizza la mono-ubiquitinazione degli istoni nucleosomiali H2A alle posizioni Lys-13 e Lys-15 (H2AK13Ub e H2AK15Ub), svolgendo un ruolo centrale nella risposta al danno del DNA.
• Agisce con UBE2N/UBC13 a valle di RNF8 per amplificare l'ubiquitinazione degli istoni H2A e H2AX alle rotture a doppia elica, promuovendo la formazione di catene di ubiquitina legate a 'Lys-63' e il reclutamento delle proteine di riparazione TP53BP1 e BRCA1.
• Viene anche reclutato nei siti di crosslink interfilamento di DNA (ICL), dove media l'ubiquitinazione legata a 'Lys-63' degli istoni H2A e H2AX, facilitando l'assemblaggio del complesso dell'anemia di Fanconi (FA) e la riparazione.
• Successivamente al danno del DNA, collabora con RNF8 per ubiquitinare e degradare JMJD2A/KDM4A, smascherando il marcatore H4K20me2 per promuovere il caricamento di TP53BP1 sui siti del danno.
• È coinvolto nella ricombinazione di cambio di classe nel sistema immunitario regolando le vie di riparazione delle rotture a doppia elica.
• Si localizza nel nucleo, dove viene reclutato alle lesioni del DNA attraverso il legame agli istoni H2A e H2AX pre-ubiquitinati.
• Appartiene alla famiglia delle proteine con dito RING; contiene un dominio RING N-terminale e motivi MIU C-terminali che mediano il legame all'ubiquitina.
• Classificato come regolatore della cromatina e fattore di riparazione del DNA; le parole chiave biologiche principali includono legame di metalli, fosfoproteina, transferasi e via di coniugazione Ubl.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 300–571 di RNF168 umano, una regione che comprende i motivi MIU C-terminali; questo design potrebbe favorire il rilevamento della proteina a lunghezza intera a ~65kDa.
• Per il Western blotting, considerare il test di estratti nucleari da linee cellulari umane o murine, poiché RNF168 si localizza nel nucleo e la sua espressione può essere indotta in condizioni di danno al DNA.
• L'ELISA può essere utilizzato per screening di supernatanti di ibridomi o per quantificare i livelli di RNF168; assicurarsi di utilizzare l'immunogeno ricombinante o un peptide rilevante come antigene di rivestimento.
• Validare la specificità dell'anticorpo e la diluizione ottimale nel proprio sistema sperimentale, poiché le prestazioni possono variare in base al tipo di campione e al trattamento.

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