Anticorpo monoclonale di coniglio anti-RNF20 per WB ed ELISA - Q5VTR2

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RNF20 (BRE1A)

• RNF20 (noto anche come BRE1A) è una proteina con dito RING che funge da subunità catalitica del complesso ligasi E3 ubiquitina-proteina RNF20/40, mediando specificamente la monoubiquitinazione dell'istone H2B alla lisina 120 (H2BK120ub1).
• H2BK120ub1 funge da marcatore epigenetico che è prerequisito per la metilazione delle lisina 4 e 79 dell'istone H3 (H3K4me e H3K79me), svolgendo un ruolo centrale nel codice istonico e nella regolazione genica.
• Il complesso RNF20/40 coopera con gli enzimi E2 UBE2A o UBE2B per formare la ligasi dell'ubiquitina dell'istone H2B ed è necessario per l'attivazione trascrizionale dei geni Hox.
• RNF20 agisce come coattivatore trascrizionale essendo reclutato al promotore di MDM2, probabilmente da p53/TP53, e media anche la poliubiquitinazione dell'isoforma 2 di PA2G4 nelle cellule tumorali, portando alla sua degradazione proteasomiale.
• La proteina si localizza esclusivamente nel nucleo, in linea con le sue funzioni di regolazione della cromatina.
• RNF20 è espresso a livello proteico nel tessuto cerebrale normale e nei gliomi maligni, ed è soggetto ad acetilazione e fosforilazione come modificazioni post-traduzionali.
• La proteina contiene un dominio coiled-coil e un motivo zinc-finger, che consentono il legame con metalli e la tipica attività di ubiquitina transferasi di tipo RING.
• Durante l'infezione microbica, RNF20 promuove il ciclo litico dell'herpesvirus umano 8 (KSHV) inducendo l'espressione di geni virali litici, incluso il gene di commutazione della latenza RTA/ORF50.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per l'analisi Western blot, considerare di arricchire le frazioni nucleari a causa della localizzazione nucleare di RNF20 per migliorare la sensibilità di rilevamento.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli di knockdown o knockout nella linea cellulare o nel sistema tissutale rilevante.
• L'immunogeno peptidico sintetico (aa 1-100 di RNF20 umano) può essere utilizzato come controllo positivo nei saggi ELISA per confermare la reattività dell'anticorpo.
• Data la reattività incrociata con umano e topo, l'anticorpo può essere adatto per studi su modelli murini, ma si consiglia la titolazione e la convalida nel tipo di campione specifico.
• Poiché RNF20 subisce fosforilazione e acetilazione, potrebbero apparire bande aggiuntive in determinate condizioni; trattamenti con fosfatasi o deacetilasi possono aiutare a confermare l'identità delle bande.

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