Anticorpo policlonale di coniglio anti-RNF4 per WB, ELISA - P78317

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RNF4

• RNF4 (SLX5, SNURF) è una ligasi E3 ubiquitina-proteina che si lega specificamente alle catene polisumoilate e media la poliubiquitinazione (legami Lys-6, Lys-11, Lys-48, Lys-63), indirizzando i substrati alla degradazione proteasomiale.
  Riferimenti correlati: PMID:18408734, PMID:19307308, PMID:35013556

• Regola la degradazione di importanti proteine cellulari tra cui PML, l'attivatore trascrizionale PEA3 e PARP1 sumoilato, svolgendo ruoli sia nel controllo trascrizionale che nella risposta al danno al DNA.
  Riferimenti correlati: PMID:18408734, PMID:19307308, PMID:20943951, PMID:35013556

• RNF4 è critico per l'allineamento cromosomico e l'assemblaggio del fuso durante la mitosi indirizzando alla degradazione CENPI polisumoilato nel complesso cinetocorico CENPH-CENPI-CENPK.
  Riferimenti correlati: PMID:20212317

• Modula le risposte cellulari all'ipossia e allo shock termico mediando rispettivamente la degradazione di EPAS1/HIF-2α e PARP1.
  Riferimenti correlati: PMID:19779455, PMID:20026589

• In alternativa, RNF4 può legare DNA/nucleosomi e potenziare la trascrizione basale e mediata dai recettori steroidei, indicando una funzione di regolazione trascrizionale diretta.
  Riferimenti correlati: PMID:12885770

• La proteina contiene un dominio dito ad anello (RING finger) e motivi a dito di zinco multipli, coerenti con le sue attività di legame al DNA e di ligasi E3 (Parole chiave: legame al DNA, legame metallico, Zinco, dito di zinco).

• A livello subcellulare, RNF4 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nei corpi nucleari PML, riflettendo il suo coinvolgimento sia nei processi nucleari che citoplasmatici.

• Ampiamente espresso a bassi livelli in molti tessuti, con alta espressione nei testicoli, suggerendo un ruolo specializzato nello sviluppo delle cellule germinali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli aminoacidi 1-190 di RNF4 umano, coprendo la regione N-terminale che include motivi a dito di zinco multipli e il dominio RING. Questo design può produrre anticorpi in grado di riconoscere sia la proteina a lunghezza intera che i frammenti N-terminali.
• Per il Western blotting, è prevista una banda intorno a 21 kDa per RNF4 non modificato. A causa di estese modificazioni post-traduzionali (sumoilazione, ubiquitinazione), potrebbero essere osservate bande aggiuntive. Validare in campioni con alto RNF4 endogeno, come il tessuto testicolare.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o substrati sumoilati per dimostrare la specificità; le condizioni di ELISA indiretta devono essere determinate empiricamente.
• È riportata la reattività crociata con topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno, poiché la sequenza N-terminale è altamente conservata tra queste specie.

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