Anticorpo monoclonale di coniglio anti-RNF40 per WB, IHC-P, ELISA - O75150

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di RNF40/BRE1B

• RNF40 codifica per la E3 ubiquitina-proteina ligasi BRE1B, nota anche come proteina associata al retinoblastoma da 95 kDa (RBP95) e proteina a dito di zinco 40 (RING finger protein 40). È un membro della famiglia delle E3 ubiquitina transferasi di tipo RING, caratterizzata da un dominio RING finger che media il legame con lo zinco e l'attività di ubiquitina ligasi.
• BRE1B forma un complesso funzionale con RNF20 per catalizzare la monoubiquitinazione dell'istone H2B sulla lisina 120 (H2BK120ub1). Questa modifica funge da marcatore epigenetico specifico per l'attivazione trascrizionale ed è essenziale per la successiva metilazione dell'istone H3 sulle lisine 4 e 79 (H3K4me e H3K79me).
• Attraverso il suo ruolo nell'ubiquitinazione dell'H2B, il complesso RNF20/40 è centrale per il codice istonico e la regolazione genica. È necessario per l'attivazione trascrizionale dei geni Hox e probabilmente di molti altri loci correlati allo sviluppo e alla proliferazione.
• BRE1B è localizzato prevalentemente nel nucleo, coerentemente con la sua funzione nella modifica della cromatina e nel controllo trascrizionale.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, con livelli più elevati osservati nei testicoli, nel cuore e nel pancreas, e livelli inferiori nei polmoni, nel muscolo scheletrico e nell'intestino tenue.
• Le modifiche post-traduzionali di BRE1B includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività, la stabilità o le interazioni proteiche. Molteplici isoforme sono prodotte tramite splicing alternativo.
• Nel contesto dell'infezione microbica, è stato dimostrato che BRE1B promuove il ciclo litico dell'herpesvirus umano 8 (KSHV) inducendo l'espressione di geni virali litici, incluso il gene master switch di latenza RTA/ORF50.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno dei residui 231-431 di RNF40 umano, quindi l'anticorpo può riconoscere la proteina a lunghezza intera e alcune varianti di isoforme. Validare la specificità nel proprio sistema modello.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 114 kDa; utilizzare controlli di caricamento appropriati e verificare l'identità della banda con lisati rilevanti.
• In IHC-P, ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e attendersi una colorazione nucleare corrispondente alla localizzazione subcellulare della proteina.
• Per l'ELISA, prendere in considerazione l'utilizzo di una proteina RNF40 ricombinante come standard per quantificare il legame dell'anticorpo e le prestazioni del saggio.
• La reattività crociata è confermata per umano e topo; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno prima dell'uso sperimentale.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, offre un'elevata affinità e riproducibilità lotto-lotto, rendendolo adatto per risultati robusti e coerenti nella ricerca e nelle applicazioni diagnostiche.

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