Anticorpo policlonale anti-RNF8 per WB, ELISA - O76064

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RNF8

• RNF8 è una ligasi E3 ubiquitina-proteica che svolge un ruolo centrale nella segnalazione del danno al DNA mediando l'ubiquitinazione legata a 'Lys-63' degli istoni H2A e H2AX alle rotture a doppia elica (DSB), promuovendo così il reclutamento di proteine di riparazione del DNA come TP53BP1 e BRCA1 (PubMed:18001824, 18006705). Riferimenti correlati: PMID:18001824, PMID:18006705
• Catalizza anche catene poliubiquitina legate a 'Lys-48', prendendo di mira substrati come JMJD2A/KDM4A per la degradazione, il che svela i marchi H4K20me2 e facilita il reclutamento di TP53BP1 nei siti di danno al DNA (PubMed:11322894, 14981089, 17724460). Riferimenti correlati: PMID:11322894, PMID:14981089, PMID:17724460
• RNF8 contribuisce alla riparazione dei cross-link interfilamento e all'attivazione della via dell'anemia di Fanconi attraverso l'ubiquitinazione di H2A/H2AX, e promuove il giunzione di estremità non omologa degradando KU80/XRCC5.
• È coinvolto nella decompattazione della cromatina di ordine superiore e regola le modifiche degli istoni, inclusa l'ubiquitinazione di H2B e l'acetilazione di H4K16, per facilitare l'attivazione della chinasi ATM.
• La localizzazione subcellulare include il nucleo, il citoplasma, il corpo centrale e i telomeri, coerente con i suoi ruoli nella riparazione del DNA, nella mitosi e nella manutenzione dei telomeri.
• È espresso ubiquitariamente, con i livelli più alti nel cervello adulto e nei testicoli, e svolge un ruolo critico nella spermatogenesi mediando la sostituzione degli istoni.
• Funzioni aggiuntive includono la ricombinazione di cambio di classe immunitaria (PubMed:22865450) e la potenziale regolazione dell'attività trascrizionale di RXRA. Riferimenti correlati: PMID:22865450

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, i lisati cellulari totali da linee cellulari umane, murine o di ratto sono appropriati; il peso molecolare previsto è di circa 56 kDa, ma le modifiche post-traduzionali possono causare bande aggiuntive.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; considerare l'uso dell'immunogeno ricombinante (amminoacidi 230-485) come controllo positivo.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata; validare le prestazioni nel contesto sperimentale specifico.
• Per potenziare il rilevamento dell'attività di RNF8 correlata al danno al DNA, considerare l'induzione di DSB con radiazioni ionizzanti o agenti chimici prima della preparazione del campione.

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