Anticorpo policlonale coniglio anti-ROCK1 per WB, IP, IF, ELISA - Q13464

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ROCK1

• ROCK1 è una serina/treonina protein chinasi membro della famiglia delle protein chinasi associate a Rho contenenti il dominio a spirale. È anche nota come ROCK-I o p160ROCK, ed è stata identificata come antigene del carcinoma renale NY-REN-35.
• ROCK1 è un regolatore chiave del citoschelecitico di actina e della polarità cellulare, controlla la contrazione della muscolatura liscia, l'organizzazione dell'actina, la formazione di fibre di stress e delle adesioni focali, la retrazione dei neuriti, l'adesione e la motilità cellulare attraverso la fosforilazione di substrati come DAPK3, GFAP, LIMK1/2, MYL9/MLC2, PFN1 e PPP1R12A. Riferimenti correlati: PMID:10436159, PMID:10652353, PMID:11018042
• ROCK1 fosforila FHOD1 e promuove sinergicamente la formazione di bleb della membrana plasmatica non apoptotica dipendente da SRC. Riferimenti correlati: PMID:18694941
• Dopo stress indotto da UVB, ROCK1 fosforila JIP3 e regola il reclutamento di JNK su JIP3. Riferimenti correlati: PMID:19036714
• Agisce come regolatore negativo dell'attivazione delle cellule endoteliali angiogeniche indotta da VEGF. Riferimenti correlati: PMID:19181962
• Promuove la differenziazione terminale dei cheratinociti. Riferimenti correlati: PMID:19997641
• Svolge un ruolo nella differenziazione eritroide terminale. Riferimenti correlati: PMID:21072057
• ROCK1 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro, nel centrosoma, nella centriola, nella membrana dell'apparato di Golgi e nella membrana cellulare. Si trova anche nelle proiezioni cellulari tra cui bleb, lamellipodi e ruffles.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 400–660 nella metà N-terminale di ROCK1, il che può consentire il riconoscimento della proteina full-length e potenzialmente di alcune isoforme. Verificare la reattività nel sistema di campioni pertinente.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 158 kDa. Utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad esempio, SDS-PAGE al 6–8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), titolare la quantità di anticorpo e selezionare un buffer di legaggio/lavaggio adatto per massimizzare l'efficienza di cattura.
• Per l'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), considerare il recupero dell'antigene indotto da calore e includere tessuti di controllo sia positivi che negativi.
• Per ELISA, testare contro la proteina ROCK1 ricombinante o lisati nativi per determinare le condizioni ottimali di rivestimento e rilevazione. Convalidare con campioni noti positivi/negativi.

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