Anticorpo Policlonale Anti-ROCK2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75116

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ROCK2

• La proteina chinasi 2 associata a Rho (ROCK2), anche nota come ROCK-II o p164 ROCK-2, è una serina/treonina-protein chinasi codificata dal gene ROCK2.
• Svolge il ruolo di regolatore chiave del citoscheletro di actina e della polarità cellulare, mediando la contrazione della muscolatura liscia, la formazione di fibre di stress, la dinamica delle adesioni focali, la retrazione dei neuriti e la motilità cellulare attraverso la fosforilazione di molteplici substrati tra cui ADD1, CNN1, EZR, MYL9/MLC2 e VIM.
• ROCK2 fosforila e attiva MAPK1/3 e RPS6KA1 durante la differenziazione miogena e agisce come regolatore negativo dell'attivazione delle cellule endoteliali angiogeniche indotta da VEGF.
• Svolge un ruolo importante nella duplicazione del centrosoma e contribuisce alla generazione di ritmi circadiani nella contrattilità vascolare modulando la fosforilazione della catena leggera della miosina.
• Subcellolarmente, ROCK2 si localizza nel citoplasma, sulla membrana cellulare, nel nucleo, sul citoscheletro e nel centrosoma.
• A livello proteico, ROCK2 è espressa specificamente nel cervello e le sue caratteristiche strutturali includono domini a coiled-coil, a dito di zinco e domini chinasi (leganti ATP, leganti magnesio e metalli).

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde alla regione C-terminale (aa 1109–1388) della ROCK2 umana, che include i domini pleckstrin omologia e ricchi di cisteina. Questo design dovrebbe generare anticorpi che riconoscono epitopi nella metà C-terminale della proteina.
• Per il Western blotting, è attesa una banda di circa 160–161 kDa nei lisati di tessuti/cellule di uomo, topo o ratto. Includere controlli positivi appropriati come il lisato di cervello (tessuto di espressione nota) e convalidare la banda specifica utilizzando il silenziamento con siRNA o il peptide competitivo, se necessario.
• Nell'immunistochimica (IHC‑P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), tenere conto che ROCK2 mostra un'ampia distribuzione subcellulare (citoplasma, membrana, nucleo e centrosoma); ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione e includere controlli isotipici.
• L'anticorpo è adatto anche per ELISA; abbinarlo a un sistema di cattura/rilevamento convalidato per la vostra matrice. Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, è necessario valutare la variazione tra lotti se si cambia lotto.

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