Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-RPA70/RPA1 per WB, IP, ELISA, ChIP - P2766

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RPA70/RPA1

• La subunità RPA70, codificata da RPA1 (nota anche come REPA1), è il componente di legame al DNA da 70 kDa del complesso eterotrimerico della proteina di replicazione A (RPA), che include anche le subunità RPA2 e RPA3. Insieme, si legano e stabilizzano gli intermedi di DNA a filamento singolo (ssDNA).
• RPA è indispensabile per la replicazione del DNA cromosomico e orchestra la risposta cellulare al danno al DNA. Attiva i checkpoint di danno al DNA e facilita la scelta della via di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:9430682
• Attraverso il reclutamento di ATRIP, RPA attiva la chinasi ATR, un regolatore principale della risposta al danno al DNA, collegando il rilevamento di ssDNA alla segnalazione globale dei checkpoint. Riferimenti correlati: PMID:24332808
• RPA è richiesta per il reclutamento dei fattori di ricombinazione omologa RAD51 e RAD52 sulla cromatina nei siti di rottura a doppia elica del DNA. Riferimenti correlati: PMID:17765923
• Nella riparazione per escissione di nucleotidi (NER), RPA recluta direttamente XPA e XPG nei siti danneggiati ed è essenziale per il passaggio di doppia incisione/escissione di questa via di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:7697716
• RPA contribuisce alla manutenzione dei telomeri, preservando l'integrità genomica, e le mutazioni in RPA1 sono collegate a disturbi della biologia telomerica. Riferimenti correlati: PMID:17959650 | PMID:34767620
• Un complesso RPA alternativo, aRPA, si forma quando RPA4 sostituisce RPA2. Questo complesso mantiene la capacità di legare ssDNA ma funziona principalmente nella riparazione del DNA piuttosto che nella replicazione del DNA cromosomico. Riferimenti correlati: PMID:19996105
• RPA stimola l'attività elicasi 5'-3' di BRIP1/FANCJ, collegandola alla riparazione dei crosslink interfilamento e mantenendo la stabilità della forcella di replicazione. Riferimenti correlati: PMID:17596542
• RPA70 è prevalentemente nucleare e si localizza nei corpi PML. È soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, inclusa fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività e le interazioni proteiche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico all'interno della regione N-terminale (aminoacidi 1–100). Per il Western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 68 kDa; i lisati cellulari totali da cellule coltivate umane o di ratto sono materiali di partenza adatti.
• Per gli saggi ChIP, notare che l'epitopo si trova in una regione non strutturata; considerare l'induzione di danno al DNA (es. trattamento con UV o idrossiurea) per arricchire i loci legati a RPA e verificare le prestazioni.
• Nelle applicazioni IP ed ELISA, pre-testare l'anticorpo nelle vostre specifiche condizioni di tampone, poiché riconosce un epitopo lineare. Includere i controlli appropriati.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel vostro sistema utilizzando campioni con knockdown mediato da siRNA o knockout CRISPR/Cas9.

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