Anticorpo policlonale di coniglio anti-RPA70/RPA1 per WB, IHC-P, ELISA - P27694

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RPA70/RPA1

• La subunità da 70 kDa della proteina A della replicazione legante il DNA (RPA70) è la subunità più grande del complesso RPA eterotrimerico, che si lega e stabilizza gli intermedi di DNA a singolo filamento formati durante la replicazione e la riparazione del DNA, impedendone il riappaiamento e coordinando il reclutamento delle proteine (PubMed:17596542, PubMed:27723717, PubMed:27723720). Riferimenti correlati: PMID:17596542, PMID:27723717, PMID:27723720
• Essenziale per la replicazione del DNA e per la risposta cellulare al danno del DNA, il complesso RPA coordina la riparazione del DNA e l'attivazione dei checkpoint (PubMed:9430682). Riferimenti correlati: PMID:9430682
• RPA recluta e attiva la chinasi ATR tramite ATRIP, posizionandola come regolatore principale della risposta al danno del DNA (PubMed:24332808). Riferimenti correlati: PMID:24332808
• Facilita il reclutamento di RAD51 e RAD52 sulla cromatina in corrispondenza delle rotture a doppio filamento del DNA, promuovendo così la riparazione mediante ricombinazione omologa (PubMed:17765923). Riferimenti correlati: PMID:17765923
• RPA70 interagisce direttamente con i fattori della riparazione per escissione dei nucleotidi XPA e XPG ed è necessario per questa via di riparazione (PubMed:7697716). Riferimenti correlati: PMID:7697716
• Inoltre, RPA70 partecipa alla riparazione per escissione di basi tramite l'interazione con UNG (PubMed:9765279), contribuisce al mantenimento dei telomeri (PubMed:17959650, PubMed:34767620) e, come parte del complesso alternativo aRPA, può supportare la riparazione del DNA ma non la replicazione del DNA cromosomico (PubMed:19996105). Riferimenti correlati: PMID:9765279, PMID:17959650, PMID:34767620, PMID:19996105
• A livello subcellulare, RPA70 si localizza nel nucleo e nei corpi PML, in linea con le sue funzioni nel metabolismo del DNA.
• Estese modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione, ne regolano l'attività; la proteina contiene domini a dita di zinco essenziali per il legame al DNA.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai primi 1–240 amminoacidi N-terminali di RPA70 umano. Per il Western blot, si prevede una banda specifica a circa 68 kDa nei lisati di cellule umane; si consiglia di utilizzare estratti nucleari per arricchire il segnale.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), può essere necessario il recupero antigenico; si prevede una colorazione nucleare. Validare i pattern di colorazione in tessuti di controllo positivi e negativi appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per ELISA; si raccomanda di ottimizzare la concentrazione di rivestimento e le condizioni di blocco.
• Poiché RPA70 è altamente conservata, potrebbe essere possibile una reattività crociata con altre specie (ad esempio topo e ratto), ma ciò non è garantito; verificare la specie prevista qualora l'anticorpo venga utilizzato oltre l'uomo.

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