Anticorpo policlonale anti-RPE65 per WB e ELISA - Q16518

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RPE65

• RPE65, noto anche come isomeroidrolasi retinoica, p63, BCO3, LCA2, RP20, rd12, mRPE65 e sRPE65, è un enzima chiave nel ciclo visivo.
• Catalizza la scissione isomeroidrolasica degli esteri di all-trans-retinile a 11-cis-retinolo, un passaggio critico nella rigenerazione del cromoforo visivo 11-cis-retinale. Riferimenti correlati: PMID:16116091
• RPE65 è essenziale per la produzione di 11-cis retinale sia per i fotorecettori a bastoncello che per quelli a cono, come dimostrato negli studi funzionali. Riferimenti correlati: PMID:17848510
• L'enzima mostra anche attività isomerasica verso la luteina, convertendola in meso-zeaxantina, un carotenoide specifico dell'occhio. Riferimenti correlati: PMID:28874556
• A livello subcellulare, RPE65 si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare e nelle membrane microsomiali, con la sua associazione alla membrana regolata dalla palmitoilazione.
• La sua espressione è altamente specifica per l'epitelio pigmentario retinico (RPE) a livello proteico.
• Le mutazioni nel gene RPE65 sono collegate a distrofie retiniche ereditarie, inclusa l'amaurosi congenita di Leber di tipo 2 (LCA2) e la retinite pigmentosa di tipo 20 (RP20).
• Le modificazioni post-traduzionali come l'acetilazione, la palmitoilazione e la fosforilazione svolgono ruoli importanti nella modulazione della sua attività e del traffico subcellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 340–440 di RPE65 umano, una regione ben conservata tra umano e topo, che probabilmente spiega la reattività crociata osservata. Gli utenti dovrebbero verificare la reattività con altre specie se necessario mediante allineamento delle sequenze.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è 61 kDa. Includere controlli positivi appropriati (es. lisati di epitelio pigmentario retinico) e ottimizzare le condizioni di blocco per minimizzare le bande non specifiche.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere esplorato come reagente di cattura o rilevamento. Si raccomanda la titolazione nel tampone di saggio specifico per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Dato che RPE65 è una proteina associata alla membrana, considerare l'uso di tamponi di lisi contenenti detergenti delicati (come Triton X-100 o NP-40 allo 0,1%) per migliorare l'efficienza di estrazione proteica per le applicazioni a valle.

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