Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-RPN1 per WB, ELISA - P04843

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RPN1

• RPN1, nota anche come riboforina I (RPN-I) o subunità 67 kDa della dolichil-difosfooligosaccaride--proteina glicosiltransferasi, è una subunità centrale del complesso oligosaccaril transferasi (OST).
• Il complesso OST catalizza il trasferimento iniziale di un glicano definito (Glc3Man9GlcNAc2) dal dolichol-pirofosfato ai residui di asparagina all'interno dei motivi di consenso Asn-X-Ser/Thr, il primo passo nella N-glicosilazione proteica (PMID:31831667). Riferimenti correlati: PMID:31831667
• La N-glicosilazione avviene co-traslazionalmente, e il complesso OST si associa al complesso traslocone Sec61 sulla membrana del reticolo endoplasmatico (ER).
• RPN1 è una proteina integrale di membrana localizzata nella membrana del RE ed è stata identificata anche nei melanosomi.
• È espressa in tutti i tessuti testati, indicando un ruolo ubiquo nella sintesi delle glicoproteine.
• Tutte le subunità del complesso OST sono necessarie per la massima attività enzimatica, sottolineando il ruolo essenziale di RPN1 in una N-glicosilazione efficiente.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e ubiquitinazione, e contiene un peptide segnale e un'elica transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 22-350) dell'RPN1 umano. Questa regione è in gran parte luminale e si prevede che riconosca la proteina nativa nella sua conformazione localizzata nel RE.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 68 kDa. Utilizzare condizioni riducenti e appropriati controlli di caricamento. Validare con lisati di controllo positivo da linee cellulari umane, di topo o di ratto (es. HeLa, HEK293, NIH/3T3).
• In ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento diretto o la cattura della proteina RPN1 ricombinante; considerare di testarlo contro la sequenza dell'immunogeno o la proteina a lunghezza intera.
• La reattività crociata con RPN1 di topo e ratto è stata osservata nella validazione del fornitore, ma è consigliabile confermare le prestazioni specifiche per specie nel proprio sistema sperimentale.
• Quando si utilizza per il rilevamento dell'RPN1 endogeno, notare che la proteina è ampiamente espressa; tuttavia, i livelli di espressione possono variare. Potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione della diluizione dell'anticorpo.

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