Anticorpo policlonale di coniglio anti-RPN1 per WB, IHC-P, ELISA - P04843

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di RPN1

• RPN1 codifica la subunità da 67 kDa della dolichil-difosfo-oligosaccaride--proteina glicosiltransferasi, nota anche come Riboforina I (RPN-I), un componente fondamentale del complesso oligosaccariltransferasi (OST).
• Il complesso OST catalizza la fase iniziale della N-glicosilazione trasferendo un glicano preassemblato dal dolicolo-pirofosfato ai residui di asparagina all'interno dei motivi Asn-X-Ser/Thr sui polipeptidi nascenti (PubMed:31831667). Riferimenti correlati: PMID:31831667
• RPN1 è una proteina integrale di membrana del reticolo endoplasmatico (ER) e si associa al complesso traslocone Sec61 per facilitare la glicosilazione cotraduzionale.
• Tutte le subunità OST, inclusa RPN1, sono necessarie per ottenere la massima attività catalitica, evidenziandone il ruolo indispensabile nell'elaborazione delle proteine.
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana del reticolo endoplasmatico e, inoltre, i melanosomi, come identificato mediante analisi proteomiche.
• È espressa ubiquitariamente in tutti i tessuti analizzati, in accordo con una funzione fondamentale di mantenimento nella biosintesi delle glicoproteine.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e ubiquitinazione, che possono regolare la stabilità o le interazioni della proteina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 20-280, corrispondenti a una regione conservata di RPN1 umano; è prevista una reattività crociata con topo e ratto sulla base dell'omologia di sequenza.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 69 kDa, ma la proteina endogena può migrare diversamente a causa della glicosilazione o di altre modifiche; considerare l'uso di enzimi deglicosilanti se si osservano bande anomale.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero antigenico devono essere ottimizzati e i tessuti con elevata attività secretoria (ad es. fegato, pancreas) possono essere utilizzati come controlli positivi.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo nell'applicazione prevista utilizzando controlli appropriati, come linee cellulari sottoposte a knockdown o knockout, per confermarne la specificità.
• Per l'ELISA, può essere necessario abbinarlo a un anticorpo di cattura o ottimizzare le condizioni di rivestimento, poiché questa preparazione policlonale contiene reattività verso epitopi multipli.

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